全血液蛋白質(zhì)檢測方法

蛋白質(zhì)組研究要求有高分辨率的蛋白質(zhì)分離及準確、靈敏的質(zhì)譜鑒定技術(shù)。凝膠電泳中蛋白質(zhì)的著色不僅影響蛋白質(zhì)分離的分辨率，同時也影響后續(xù)的質(zhì)譜鑒定。選擇適當?shù)牡鞍踪|(zhì)染色法將有助于提高蛋白質(zhì)組學研究結(jié)果的質(zhì)量。
        一  血清總蛋白測定 
        血清總蛋白（Total protein，TP）為血清中所含各種蛋白質(zhì)的總稱，包括白蛋白和球蛋白兩部分。
        【參考值】   
        60～80 g/L （雙縮脲法）
        【臨床意義】   
        1.血清總蛋白濃度增高
        （1）凡體內(nèi)水分的排出大于水分的攝入時：引起血漿濃縮，尤其是急性失水時，如嘔吐、腹瀉、高熱等，而使總蛋白濃度相對增高，血清總蛋白濃度有時可達100～150g/L。慢性腎上腺皮質(zhì)功能減退患者，由于鈉的丟失而導致繼發(fā)性水分丟失，血漿也可出現(xiàn)濃縮現(xiàn)象。
        （2）蛋白質(zhì)合成增加：如多發(fā)性骨髓瘤患者主要是球蛋白的增加，其量可超過50g/L，總蛋白可超過100g/L。
        2.血清總蛋白濃度降低 
        （1）血漿中水分增加：血漿被稀釋，如靜脈注射過多低滲溶液或因各種原因引起的水鈉潴留。
        （2）營養(yǎng)不良和消耗增加：如長期食物中蛋白質(zhì)含量不足或慢性腸道疾病所引起的吸收不良，使體內(nèi)缺乏合成蛋白質(zhì)的原料或因長期患消耗性疾病，如嚴重結(jié)核病、甲狀腺功能亢進、惡性腫瘤等。
        （3）合成障礙：主要是肝功能障礙。肝臟是合成蛋白質(zhì)的*場所，肝臟功能嚴重損害時，蛋白質(zhì)合成減少，以白蛋白的下降zui為顯著。
        （4）蛋白質(zhì)丟失：如嚴重燙傷、燒傷時，大量血漿滲出，或大出血時；腎病綜合征時，尿液中長期丟失蛋白質(zhì)；潰瘍性結(jié)腸炎時可從糞便中長期丟失一定量的蛋白質(zhì)，這些均可使血清總蛋白濃度降低。
        【注意事項】   
        1.標本采集  取靜脈血3～4ml于不抗凝試管（肝功管）中送檢。
        2.標本影響  脂血、高膽紅素血癥及溶血標本均對結(jié)果造成影響。
        3.藥物影響  酚酞、磺溴酞鈉在堿性溶液中呈色，影響雙縮脲的測定結(jié)果；氨基酸和促蛋白質(zhì)合成藥會使結(jié)果偏高；抗癲癇藥物、吡嗪酰胺、利福平、避孕藥，可使結(jié)果偏低。
        二  血清白蛋白
        白蛋白（albumin，Alb）是由肝實質(zhì)細胞合成，是血漿中含量zui多的蛋白質(zhì)，在維持血液膠體滲透壓、體內(nèi)代謝物質(zhì)轉(zhuǎn)運及營養(yǎng)等方面起著重要作用。
        【參考值】   
        35～55g/L （溴甲酚綠法）
        【臨床意義】   
        1.血漿白蛋白濃度可以受飲食中蛋白質(zhì)攝入量影響，在一定程度上可作為個體營養(yǎng)狀態(tài)的評價指標。
        2.血漿白蛋白增高較少見，對嘔吐、高熱、腹瀉等引起的血液濃縮有診斷意義。 
        3.低白蛋白血癥常見于：①白蛋白的合成降低，常見于急性或慢性肝疾病。②營養(yǎng)不良或吸收不良。③遺傳性缺陷，無白蛋白血癥是極少見的一種代謝性缺損。④組織損傷（外科手術(shù)或創(chuàng)傷）或炎癥（感染性疾病）引起的白蛋白分解代謝增加。⑤白蛋白的異常丟失，如由于腎病綜合征、慢性腎小球腎炎、糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等，可丟失體內(nèi)大量白蛋白；燒傷及滲出性皮炎可從皮膚喪失大量白蛋白。⑥白蛋白的分布異常，如門靜脈高壓引起的腹水中大量蛋白質(zhì)，是從血管內(nèi)滲入腹腔。⑦妊娠，尤其是在妊娠晚期由于體內(nèi)對蛋白質(zhì)的需要量增加，同時又伴有血漿容量增高，血清白蛋白明顯下降，但分娩后可迅速恢復正常。
        【注意事項】   
        1.采集靜脈血3～4ml于不抗凝試管（肝功管）中送檢。
        2.脂血、溶血及嚴重黃疸標本，均對結(jié)果造成影響。
        3.青霉素、水楊酸類藥物在測定時可與白蛋白競爭結(jié)合，影響測定結(jié)果。
        三  血清球蛋白測定
        球蛋白（globulin，GLB或G）主要由單核.吞噬細胞系統(tǒng)合成，一部分在肝臟合成，包括含量較多的免疫球蛋白和補體，多種糖蛋白、脂蛋白、酶類等。球蛋白與機體免疫功能及血漿黏度密切相關(guān)。
        【參考值】   
        20～30g/L （計算法）
        【臨床意義】   
        1.血清球蛋白濃度增高  多以γ球蛋白（丙種球蛋白）增高為主，見于慢性活動性肝炎、活動性肺結(jié)核、瘧疾、血吸蟲病、麻風、風濕熱、類風濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、肝硬化、多發(fā)性骨髓瘤、腎病綜合征、絲蟲病等。
        2.血清球蛋白濃度降低  見于3歲以下嬰幼兒，肝臟和免疫系統(tǒng)未發(fā)育*的生理性減少；應用腎上腺皮質(zhì)激素或免疫抑制劑后、丙種球蛋白缺乏癥、原發(fā)性低球蛋白血癥、腎上腺皮質(zhì)功能亢進等。
        【注意事項】   
        同血清總蛋白和白蛋白測定。
        四  血清白蛋白和球蛋白比值
        【參考值】   
        1.1～2.5：1 
        【臨床意義】   
        1.肝臟損害  A/G比值可反映肝功能損害的程度，比值<1.25提示有肝臟損害；比值<l時病變嚴重，常見于肝硬化：若治療有效比值逐漸回復，可作為病情觀察和療效的指標評估。
        2.腎病綜合征  由于從腎臟丟失大量血漿蛋白，尤其是白蛋白，同時因低蛋白血癥使肝臟代償性合成脂蛋白等增加，A/G比值降低。

3.其他  慢性瘧疾、風濕熱、亞急性細菌性心內(nèi)膜炎、自身免疫性疾病、巨球蛋白血癥等，A/G均可降低。
        【注意事項】    
        同血清TP測定。 
        五  血清前白蛋白測定 
        血清前白蛋白（prealbumin，PA）在肝臟合成，屬于非急性時相反應蛋白。在判斷營養(yǎng)狀況和肝臟功能方面，是比白蛋白更加靈敏的指標。
        【參考值】   
        200～400mg/L （免疫透射比濁法）
        【臨床意義】   
        1.增高  口服避孕藥、腎上腺皮質(zhì)激素及類固醇藥物使用者，淋巴瘤患者均可增高。
        2.降低  嚴重感染、肝臟疾病、腎病綜合征、營養(yǎng)不良，急性時相反應時均可降低，病情越重，降低越明顯。
        【注意事項】   
        1.采集靜脈血3～4ml于不抗凝試管（肝功管）中送檢。
        2.PA測定原理屬抗原抗體反應，實質(zhì)上是一種濁度反應，脂血、溶血及嚴重黃疸標本、試劑渾濁均對結(jié)果造成影響。
        六  血清蛋白電泳分析（SPEP）
        【參考值】     （瓊脂糖電泳）
        白蛋白  　　  35～52g／L 　　　 0.57～0.68 
        α1球蛋白  　1.0～4.0 g／L 　  0.01～0.057
        α2球蛋白 　 4.0～8.0 g／L 　  0.049～0.112
        β 球蛋白 　  5.0～10 g／L 　　 0.07～0.13
        γ 球蛋白 　  6.0～13.0 g／L 　 0.098～0.182
        【臨床意義】   
        在疾病條件下各種蛋白條帶的數(shù)量和百分含量會有所改變。因此血清蛋白電泳對以下各種疾病的早期診斷、療效觀察和預后判斷均有十分重要的意義。
        【注意事項】   
        1.采集靜脈血3～4ml于不抗凝試管（肝功管）中送檢。
        2.標本采集時應避免溶血，血清中不含纖維蛋白，不能使用血漿標本。
        七  血紅蛋白電泳分析
        【參考值】   
        Hb A2：1.1％～3.2％（瓊脂糖凝膠電泳）
        【臨床意義】   
        1.增高  見于β-珠蛋白生成障礙性貧血。
        2.減低  見于缺鐵性貧血及其他血紅蛋白合成障礙性疾病。
        【注意事項】   
        取靜脈血3～4ml于肝素抗凝試管（腎功管，綠頭）中送檢，取全血進行測定。
        八  腦脊液蛋白電泳分析 
        【參考值】   
        陰性（瓊脂糖凝膠電泳） 
        【臨床意義】   
        陽性見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)源性合成免疫球蛋白增加（尤其是IgG），如多發(fā)性硬化癥、亞急性硬化性腦炎、腦膜腦炎、急性感染性多發(fā)性神經(jīng)炎、梅毒、外周神經(jīng)系統(tǒng)疾病、腦積水等。 
        【注意事項】   
        采集2ml腦脊液并同時用肝功管采集病人靜脈血3ml。
九  免疫固定電泳分析
        【參考值】      
        陰性（瓊脂糖凝膠電泳）
        【臨床意義】    
        1.陽性多見于多發(fā)性骨髓瘤，巨球蛋白血癥，非霍奇金淋巴瘤等。
        2.能確定IgM、IgG、Kappa、Lambda類型及反映M蛋白類型，從而指導臨床用藥。 
        【注意事項】   
        取靜脈血3～4ml于不抗凝試管中送檢，離心后取血清測定