人纖維連接蛋白溶液在細(xì)胞生長(zhǎng)中的作用說(shuō)明
細(xì)胞纖連蛋白(fibronectin,FN)是一種細(xì)胞外糖蛋白,分別以可溶形式存在于體液中,或以不可溶形式存在于細(xì)胞外基質(zhì)中。作為主要的細(xì)胞粘附分子之一,FN在許多重要的生理過(guò)程中起著關(guān)鍵性作用,如胚胎生成,傷口愈合,止血和血栓形成。纖連蛋白表達(dá)的改變,降解以及組合與大量的病理發(fā)生密切相關(guān),包括癌癥和纖維化。
FN一般以二聚體形式分泌,各個(gè)單體的分子量為220~250kDa。主要由成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和肌細(xì)胞等合成,并分布在周?chē)?。?huì)激發(fā)一系列的免疫級(jí)聯(lián)反應(yīng),FN在T細(xì)胞活化過(guò)程表現(xiàn)為激活因子。所有FN由同一個(gè)基因編碼產(chǎn)生,因轉(zhuǎn)錄后的mRNA經(jīng)組織特異性的不同切割方式生成不同的翻譯產(chǎn)物。FN上的多個(gè)結(jié)構(gòu)域能與膠原、纖維蛋白、肝素和特異性細(xì)胞膜受體結(jié)合。其中廣為人知的結(jié)合域是Arg-Gly-Asp序列(RGD),為整合素識(shí)別后調(diào)控細(xì)胞粘附。FN參與體內(nèi)眾多生理作用和功能,如各種細(xì)胞間的吸附和遷移,細(xì)胞骨架組裝,酪氨酸磷酸化和腫瘤轉(zhuǎn)移等。
纖連蛋白(FN)的應(yīng)用:1)作為細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì);功能在于促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng),提高細(xì)胞貼壁率,增強(qiáng)細(xì)胞代謝水平,縮短細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間;雜交瘤技術(shù)中提高細(xì)胞融合率等。2)疾病診斷和治療;功能在于傷口修復(fù)和愈合,癌癥診斷和治療,治療血管系統(tǒng)和心腦血管疾病等。
艾美捷人纖維連接蛋白溶液,0.5 mg/ml,1 mg :
貨號(hào):ABM-5050-1MG
來(lái)源:人類(lèi)血漿
純度:纖維連接蛋白的純度>95%,基于7% SDS-PAGE的考馬斯亮藍(lán)染色。
濃度:纖維連接蛋白的濃度為0.5 mg/ml,每1.0 mg纖維連接蛋白溶解在2.0 ml緩沖液中。
細(xì)胞附著活性:24孔板在PBS中(每孔0.3毫升)中涂覆纖維連接蛋白,于37°C孵育過(guò)夜。經(jīng)BSA阻斷后,TIG-3細(xì)胞(JCRB 0506)(每孔5 X 104細(xì)胞/1 ml DMEM)被加入,并在37°C孵育90分鐘。附著的細(xì)胞通過(guò)庫(kù)侖計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。
pH:纖維連接蛋白溶解在pH約為7的緩沖液中。
儲(chǔ)存:建議將纖維連接蛋白存放在-20°C以下,并避免重復(fù)凍結(jié)和解凍。
Advanced BioMatrix的人源纖維連接蛋白濃度為0.5 mg/ml,每1.0 mg纖維連接蛋白溶解在2.0 ml的0.45M NaCl、20mM Tris-HCl和12%甘油中。纖維連接蛋白是通過(guò)Ruoslahti等人(1)的方法從人類(lèi)血漿中純化,使用凝膠親和柱進(jìn)行滅菌處理,通過(guò)0.2µ過(guò)濾器過(guò)濾。
(1) Ruoslahti, E., E.G. Hayman M. Pierschbacher, and E.Engvall (1982) Fibronectin: Purification, immunochemicalproperties, and biological activities. Meth. Enzymol. 82 Pt A:803-831.
艾美捷科技是Advanced BioMatrix的中國(guó)代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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