腫瘤細胞培養(yǎng)成纖維細胞
依據(jù)腫瘤細胞比成纖維細胞貼壁速度慢的*的地方,并接合運用不加血清的營養(yǎng)液,把包括兩類細胞的細胞懸液反反復復貼壁,使兩類細胞互相離合,操作辦法與傳代相同。
1 待細胞成長達一定數(shù)目后,倒出舊培育液,用胰酶克化后,Hanks 沖洗2次,參加不含血清的培育液,吹打制成細胞懸液;
2 取編號為此A、B、C三個培育瓶;首先把懸液接種入A培育瓶中。置恒溫培養(yǎng)箱中靜止培育5~20分鐘后,輕輕傾側培育瓶,讓液體集中瓶角后慢慢吸出所有培育液,再接種入B培育瓶中后;向A瓶中補給少量培育液置培養(yǎng)箱中接著培育;
3 培育B瓶中細胞5~20分鐘后,接處置A的辦法,把培育液灌注C培育瓶中;再向B瓶中補加營養(yǎng)物質放培養(yǎng)箱KLYQ中。
當三個瓶內都包括培育液后,均在生化培養(yǎng)箱中接著培育。如操作成功,第二天仔細查看可見A瓶主要為成纖維細胞,B瓶兩類細胞相雜,C瓶有可能主要為癌細胞。*時可反反復復處置多次,直到癌細胞醇化截止。