1.標準的曲線方法:
該方法是根據光的吸收定律,如果液層的厚度和入射波長都沒變的話,它會在一定的濃度范圍之內,測量的吸光度和濃液中待測物質的濃度成正比。這個時候要先配置已知準確濃度的標準濃液,然后選擇坡長處分別測其吸光度A,再以標準的濃液的濃度C為橫坐標,以相應的吸光度A為縱坐標,繪制相關A-C關系圖,可以得出一條通過坐標原點的直線,這個直線叫做標準曲線。在相同條件測出試樣濃液的吸光度,然后還可從標準曲線上查出試樣濃液的濃度。
2.比較法
在相同條件下,配制被測試樣溶液及與其濃度相近的標準溶液,在所選波長處分別測量標準溶液的吸光度和試樣溶液的吸光度,根據朗伯比爾定律:
A=Kbc
A標=Kbc標
A樣=Kbc樣
c樣=c標A樣/A標
比較適用于線性關系好且通過原點的情況
3.一元線性回歸法
用吸光度A和濃度c做工作曲線,橫坐標為自變量c,縱坐標為因變量A,通常自變量可以控制和精確測量,因變量是隨機變量,有誤差。根據散點畫一條直線,稱這條直線為回歸線
若直線通過所有實驗點,可以說A與c是密切線性相關。如果實驗點不在直線上,為使誤差達到最小,需要進一步線性回歸能,設回歸方程為
Y=a+bx
式中a--回歸線在縱軸上的截距; b--回歸線的斜率;
確定a、b兩個參數,即可得到線性回歸方程。用數學上的小二乘法可以求得a、b兩個參數。帶有線性回歸的計算器可實現(xiàn)這一計算,只需輸入標準系列的濃度和相應的吸光度即可。
確立線性回歸方程后,將樣品測得的吸光度代入方程,即可求出樣品的濃度。
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