Digoxigenin-11-dUTP,通過(guò)PCR,Nick Translation等應(yīng)用整合到DNA / cDNA中,用于DNA / cDNA探針的制備,測(cè)序等方面。
Digoxigenin-11-dUTP可通過(guò)以下方法整合到DNA/cDNA中:
1.用Taq聚合酶進(jìn)行PCR
2.用DNAse I / DNA聚合酶I進(jìn)行Nick Translation
3.用Klenow exo-進(jìn)行引物延伸
4.用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)標(biāo)記寡核苷酸3'末端
5.用MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄
Digoxigenin-11-dUTP可通過(guò)以下方法整合到RNA中:
用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)標(biāo)記3'末端
推薦的用于PCR和Nick Translation的Digoxigenin-11-dUTP / dTTP比例:35% 高辛-11-dUTP / 65%dTTP
請(qǐng)注意:Digoxigenin-11-dUTP的終濃度取決于應(yīng)用和實(shí)驗(yàn)條件。為獲得良好的產(chǎn)品收率和高摻入率,建議單獨(dú)優(yōu)化Digoxigenin-11-dUTP / dTTP比率
艾美捷Digoxigenin-11-dUTP,高辛/二硝基苯酚(NU-803-DIGXS):
運(yùn)輸:通過(guò)凝膠包進(jìn)行運(yùn)輸。
存儲(chǔ)條件:應(yīng)在-20°C的環(huán)境下保存。
短期(累計(jì)最多1周)暴露于室溫下是可行的。
保質(zhì)期:12個(gè)月。
分子式:C43H65N4O21P3(自由酸形式)。
分子量:1066.91克/摩爾(自由酸形式)。
精確質(zhì)量:1066.34克/摩爾(自由酸形式)。
純度:高于或等于95%(通過(guò)高效液相色譜法測(cè)定)。
形態(tài):在10 mM Tris-HCl溶液中的過(guò)濾溶液,分子量截留30 kDa。
顏色:無(wú)色至淡黃色。
濃度:1.0 mM至1.1 mM。
pH值:7.5,誤差范圍±0.5。
光譜特性:zui大吸收波長(zhǎng)λmax為290納米,摩爾吸光系數(shù)ε為8.8 L·摩爾^-1·厘米^-1(Tris-HCl,pH 7.5)。
應(yīng)用:
生物素-11-dUTP可以通過(guò)以下方法嵌入到DNA或cDNA中:
使用Taq聚合酶進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)。
利用DNA酶I/DNA聚合酶I進(jìn)行缺口翻譯(Nick Translation)。
使用Klenow exo-進(jìn)行引物延伸(Primer Extension)。
使用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase,簡(jiǎn)稱(chēng)TdT)進(jìn)行3'端標(biāo)記。
使用MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。
此外,生物素-11-dUTP還可以通過(guò)以下方法嵌入到RNA中:
使用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)進(jìn)行3'-端標(biāo)記。
Digoxigenin-11-dUTP相關(guān)產(chǎn)品:
HighFidelity Digoxigenin PCR Labeling Kit, #APP-101-DIGX
Digoxigenin NT Labeling Kit, #PP-310-DIGX
相關(guān)產(chǎn)品
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