国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


化工儀器網>技術中心>其他文章>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

碧云天 LipoInsect轉染試劑(C0551-7.5ml)現貨供應

來源:北京百奧創(chuàng)新科技有限公司   2024年04月19日 11:04  

產品名稱:碧云天LipoInsect轉染試劑(C0551-7.5ml)現貨供應

產品貨號:C0551

產品品牌:碧云天

產品簡介:

碧云天LipoInsect轉染試劑是一種基于陽離子脂質體等最新轉染技術的非常高效的新型昆蟲細胞轉染試劑。本產品轉染效率高、操作簡單、細胞毒性低、重復性好,達到了國際最主流昆蟲細胞轉染試劑的轉染效果。
本產品適用于將pFastBac1等桿狀病毒表達載體質粒DNA轉染到Sf9、Sf21和High Five™等昆蟲細胞以用于Bac-to-Bac®、BaculoDirect™和InsectSelect™表達系統(tǒng)的蛋白表達。
Bacmid轉染:
1. 昆蟲細胞培養(yǎng)(以六孔板為例,其它培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿可參考六孔板):按照每孔約80萬Sf9或Sf21細胞(具體的細胞數量據細胞類型、大小和細胞生長速度等而定)用正常的細胞培養(yǎng)液接種到六孔板內,使細胞密度能達到約70-90%。在27-28℃培養(yǎng),后續(xù)轉染和培養(yǎng)也在該溫度下進行。
2. 15分鐘后,將正常的細胞培養(yǎng)液更換為平板培養(yǎng)液(含1.5%胎牛血清不含抗生素的SFX-INSECT培養(yǎng)液)每孔0.8ml。

3. 對于待轉染的六孔板中每一個孔的細胞,取兩個潔凈無菌離心管,分別加入100μl不含血清和抗生素的SFX-INSECT昆蟲細胞培養(yǎng)液用于稀釋bacmid和轉染試劑。其中一管加入16μg bacmid,并用槍輕輕吹打混勻;另一管加入8μl LipoInsect™轉染試劑,用槍輕輕吹打混勻,或者輕微Vortex混勻,但不可離心。稀釋的bacmid和轉染試劑室溫靜置約2-5min(最多不得超過30分鐘)。隨即把稀釋的bacmid用移液器輕輕加入到稀釋的LipoInsect™轉染試劑中,輕輕顛倒離心管或者用槍輕輕吹打混勻,室溫靜置15-30分鐘。

4. 按照六孔板每孔200μl LipoInsect™轉染試劑-bacmid混合物的用量,均勻滴加到整個孔內,隨后輕輕混勻。
5. 為達到最高的轉染效率,細胞在轉染后培養(yǎng)3-5小時后宜更換為新鮮的wan全培養(yǎng)液(對于Sf9細胞,推薦在轉染4小時后更換培養(yǎng)液)。
6. 繼續(xù)在27-28℃培養(yǎng)約96小時后,收集每孔的培養(yǎng)液,500g離心5分鐘,獲得的上清即為P1代桿狀病毒(病毒滴度通常為1×106~1×107 pfu/ml)。P1代病毒4℃避光保存,如果包裝病毒時的細胞培養(yǎng)液為無血清培養(yǎng)液宜添加胎牛血清至終濃度為2%以保護病毒被蛋白酶降解。P1代病毒近期不使用的情況,可以適當分裝后-80℃長期保存。盡量避免反復凍融病毒,反復凍融可能導致病毒滴度下降10-100倍。
7. 為獲得更高滴度的桿狀病毒,可以使用P1代病毒感染Sf9或Sf21細胞等來獲得P2代桿狀病毒(病毒滴度通常為1×107 ~1×108
pfu/ml)。具體操作請參照昆蟲細胞Bac-to-Bac Baculovious expression system的相關操作規(guī)程。大致的步驟為使用P1代病毒感染2×106個貼壁約1小時的Sf9或Sf21細胞,推薦的病毒的MOI為0.05-0.1,過高的MOI會導致獲得的病毒質量下降。27-28℃培養(yǎng)48小時后,同步驟f收集每孔的培養(yǎng)液,隨后500g離心5分鐘,獲得的上清即為P2代桿狀病毒。P2代病毒的保存條件同P1代。由于桿狀病毒在每一代的擴增過程中均易出現缺少突變,因此推薦最多擴增至P3代病毒。

產品選購:

貨號

產品名稱

規(guī)格

C0551-7.5ml

LipoInsect轉染試劑

7.5 mL


北京百奧創(chuàng)新科技有限公司現貨供應碧云天LipoInsect轉染試劑(C0551-7.5ml),歡迎選購!

碧云天 LipoInsect轉染試劑(C0551-7.5ml)現貨供應

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
信丰县| 上虞市| 揭阳市| 龙江县| 依兰县| 河池市| 云南省| 延寿县| 云和县| 虎林市| 金平| 图们市| 淅川县| 丹寨县| 赤壁市| 鲁山县| 乌苏市| 阿拉尔市| 枣庄市| 贵南县| 库伦旗| 玉树县| 甘孜| 望奎县| 黄冈市| 张家界市| 高陵县| 乌苏市| 赤水市| 班戈县| 仁寿县| 资源县| 嘉祥县| 望谟县| 开封县| 新乐市| 四会市| 道真| 乳山市| 浮山县| 景洪市|