手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
核酸品質(zhì)PC 抽提
PC 抽提是去除氨基酸的一個十分管用的手眼。苯酚能使氨基酸改變性別，改變性別后的氨基酸從水相中被析出，處于苯酚中還是苯酚/水相之間。
PC 抽提的關(guān)鍵是，一要混勻*，二要用量足夠。*混勻，能力保證苯酚與氨基酸的充分接觸，使氨基酸改變性別。人們老是擔(dān)心混勻的猛烈程度是否會對核酸，特別是基因組DNA 導(dǎo)致毀傷，其實大可不需要這么謹(jǐn)慎。猛烈的混勻操作，是會對局部打斷大分子的基因組DNA ，但該毀傷效用不會猛烈到DNA 成為10kb 以內(nèi)的小斷片。恒溫培養(yǎng)箱
手猛烈忽悠混勻后，基因組DNA 的斷片，大多會大于20kb，這個體積，除開一點尤其的要求外，對PCR 和酶切，都是適合使用的。假如要求的斷片很大，如構(gòu)建文庫用，則不可以運用猛烈的混勻辦法，而只能往返柔和顛倒混勻―此時的關(guān)鍵是：裂解液的比例要足夠大，生化培養(yǎng)箱使整體體系不要太粘稠。
用量要足夠，是由于苯酚去除氨基酸是有一定的達(dá)到zui高限度度的。超過了該達(dá)到zui高限度度，裂解整體體系中的氨基酸不會被一次去除，務(wù)必靠多次抽提，方可*去除。額外，整體體系太粘稠的害處是，氨基酸難于*去除，以及DNA 會斷開得更利害，培養(yǎng)箱 所以要注意裂解液與樣品的比例。
采購中心