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scRNA-seq+mIHC+類器官聯(lián)合揭示UPP1通過(guò)誘導(dǎo)免疫抑制微環(huán)境促進(jìn)肺腺癌進(jìn)展

來(lái)源:愛必信(上海)生物科技有限公司   2024年05月06日 11:16  

復(fù)旦大學(xué)中山醫(yī)院團(tuán)隊(duì)聯(lián)合多單位在《nature communications》上發(fā)表了題目為UPP1“ promotes lung adenocarcinoma progression through the induction of an immunosuppressive microenvironment”的研究,IF=16.6,強(qiáng)調(diào)了UPP1在肺腺癌(LUAD)中的免疫抑制作用,這些發(fā)現(xiàn)有助于了解LUAD的分子特征,并促進(jìn)個(gè)性化治療策略的發(fā)展。

圖1 文章信息

 

研究背景

 

肺癌引起的死亡在全球癌癥相關(guān)死亡中占有很大比例,肺腺LUAD是其中最主要的一種。隨著免疫療法的引入,LUAD的治療方法取得了相當(dāng)大的進(jìn)展,預(yù)后不良的情況仍然很多。

 

腫瘤微環(huán)境(TME)是一個(gè)復(fù)雜多樣的細(xì)胞環(huán)境,由多種細(xì)胞類型組成,包括腫瘤細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞,以及內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。在這種環(huán)境中,腫瘤細(xì)胞與周圍的免疫細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行復(fù)雜的相互作用。這些細(xì)胞間的相互作用是腫瘤發(fā)生、發(fā)展和最終預(yù)后的中心,培育了一種免疫抑制環(huán)境,抑制了對(duì)腫瘤的免疫反應(yīng)。

 

最近關(guān)于UPP1在LUAD中的作用的研究表明,它能夠調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞對(duì)糖酵解抑制劑的敏感性,從而驅(qū)動(dòng)糖酵解途徑并促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng),證據(jù)還表明抑制UPP1會(huì)增強(qiáng)抗腫瘤T細(xì)胞的浸潤(rùn),此外,還發(fā)現(xiàn)UPP1與TME內(nèi)的免疫檢查點(diǎn)之間存在密切關(guān)聯(lián),但UPP1在LUAD TME中的確切作用仍有待闡明。

 

研究脈絡(luò)

 

作者對(duì)LUAD進(jìn)行了單細(xì)胞RNA測(cè)序(scRNA-seq)數(shù)據(jù)分析,發(fā)現(xiàn)了一組與預(yù)后相關(guān)的UPP1high腫瘤細(xì)胞。對(duì)來(lái)自LUAD的患者樣本進(jìn)行多重免疫熒光染色,發(fā)現(xiàn)UPP1high腫瘤細(xì)胞主要位于腫瘤的侵襲性前沿。此外,發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞中UPP1的上調(diào)會(huì)影響免疫抑制細(xì)胞因子的釋放和PD-L1的表達(dá)。通過(guò)飛行時(shí)間(CyTOF)分析進(jìn)行的進(jìn)一步細(xì)胞計(jì)數(shù)證實(shí),腫瘤細(xì)胞中UPP1的上調(diào)有助于形成免疫抑制性TME。

 

主要結(jié)果

 

? 對(duì)117例LUAD患者的377574個(gè)細(xì)胞進(jìn)行了綜合單細(xì)胞RNA測(cè)序(scRNA-seq)數(shù)據(jù)分析,通過(guò)將scRNA-seq數(shù)據(jù)與大量基因表達(dá)數(shù)據(jù)聯(lián)系起來(lái),確定了一組與預(yù)后相關(guān)的UPP1高表達(dá)腫瘤細(xì)胞。

 

圖2 整合LUAD scRNA-seq數(shù)據(jù)和識(shí)別與預(yù)后相關(guān)的腫瘤細(xì)胞群

 

? 通過(guò)對(duì)LUAD患者標(biāo)本的多重免疫熒光染色,發(fā)現(xiàn)UPP1高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞主要定位于腫瘤的侵襲前沿。UPP1high腫瘤細(xì)胞與FOXP3+Tregs、MMP11+成纖維細(xì)胞、LAG3+PDCD1+CD8+耗竭T細(xì)胞和SPP1+巨噬細(xì)胞在空間距離上更接近(在多色實(shí)驗(yàn)中,作者每個(gè)樣品準(zhǔn)備了四張連續(xù)切片)。

 

圖三 LUAD患者樣本的多重免疫熒光染色(MIF)評(píng)估UPP1腫瘤細(xì)胞和相關(guān)細(xì)胞群之間的空間相關(guān)性

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? TMA組化結(jié)果、免疫印跡和流式細(xì)胞術(shù)分析表明,UPP1在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)水平與PD-L1呈正相關(guān),共培養(yǎng)及流式分析表明UPP1誘導(dǎo)的PD-L1表達(dá)可能影響CD8+T細(xì)胞的殺傷能力。

 

圖4 UPP1通過(guò)PI3K/AKT/mTOR途徑調(diào)節(jié)PD-L1的表達(dá)

 

? CyTOF分析為UPP1在形成TME的免疫抑制性質(zhì)中的作用提供了證據(jù)。

 

? 建立的6例LUAD患者來(lái)源的類器官及小鼠實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)UPP1高的腫瘤對(duì)波蘇替尼和達(dá)沙替尼的敏感性相對(duì)增加。

 

圖5 生物信息學(xué)指導(dǎo)的藥物篩選和驗(yàn)證

 

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