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小鼠胱抑素Celisa試劑盒也太好用了吧

來源:上海一基實(shí)業(yè)有限公司   2024年05月07日 09:39  

小鼠胱抑素C(Cystatin C)elisa試劑盒基本信息

1983年Anastasi等在雞蛋清中分離純化得到高純度的半胱氨酸蛋白酶抑制劑(cysteine proteinase inhibitor,CPI)后被命名為胱抑素C.是一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑,也被稱為γ-微量蛋白及γ-后球蛋白,廣泛存在于各種組織的有核細(xì)胞和體液中,是一種低分子量、堿性非糖化蛋白質(zhì),分子量為13.3KD,由122個(gè)氨基酸殘基組成,可由機(jī)體所有有核細(xì)胞產(chǎn)生,產(chǎn)生率恒定。循環(huán)中的胱抑素 c僅經(jīng)腎小球?yàn)V過而被清除,是一種反映腎小球?yàn)V過率變化的內(nèi)源性標(biāo)志物,并在近曲小管重吸收,但重吸收后被*代謝分解,不返回血液,因此,其血中濃度由腎小球?yàn)V過決定,而不依賴任何外來因素,如性別、年齡、飲食的影響,是一種反映腎小球?yàn)V過率變化的理想同源性標(biāo)志物。

小鼠胱抑素C(Cystatin C)elisa試劑盒操作方法

實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。

為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。

3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。

5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。

購買我司elisa試劑盒可以提供免費(fèi)代測服務(wù),客戶準(zhǔn)備好樣本,上海和南京地區(qū)的客戶可以提供免費(fèi)上門取樣服務(wù)。其他地區(qū)的客戶,樣本用泡沫箱子包好,放干冰或者冰袋寄送給我們。代測時(shí)間為5到7個(gè)工作日提供原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù), 實(shí)驗(yàn)操作步驟以及實(shí)驗(yàn)所用儀器。


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