手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
ELISA法的免疫反應(yīng)部分中，抗原-抗體的親和力、抗原和半抗原的性質(zhì)、測定方法的實驗條件、酶標(biāo)記物的性質(zhì)等因素均會影響反應(yīng)的敏感性。在酶學(xué)反應(yīng)部分中，酶的濃度、底物的濃度、反應(yīng)pH、溫度、酶的抑制劑和激活劑等因素也影響反應(yīng)的敏感性。下面讓我們一起來看看ELISA實驗的注意事項吧！
需要注意以下幾點：
(1)待測樣品溶液中不能存在與標(biāo)記酶相同的酶、底物、酶抑制劑和其他干擾因素，以防止干擾作用。
(2)聚苯乙烯反應(yīng)板測定時，溶液宜垂直滴入凹孔中間，相繼加入的溶液都覆蓋相同的載體表面積。在吸附、溫育和洗滌等操作中應(yīng)避免劇烈震搖、攪拌等，以保證恒定的吸附容量。在洗滌操作中，由于聚苯乙烯反應(yīng)板凹孔容量小、孔間距離近，故洗滌時要注意每次加入的洗滌液量既要達(dá)到洗滌充分又要避免相鄰孔內(nèi)液體互相污染。
(3)在ELISA中血清陰性對照的顯色反應(yīng)常常是因酶結(jié)合物與固相之間的非特異性吸附所致，可在酶結(jié)合物稀釋時中加入去污劑(如Tween-20)或非特異性蛋白質(zhì)(牛血清白蛋白)，減少酶結(jié)合物的非特異性吸附作用。稀釋的酶結(jié)合物置于室溫條件下過久，會影響底物的顯色反應(yīng)，所以酶結(jié)合物應(yīng)在使用前稀釋。
(4)一些底物如OPD和TMB在暗處穩(wěn)定，底物溶液要現(xiàn)用現(xiàn)配，酶促反應(yīng)時注意避光。某些含苯環(huán)的底物有致畸變作用或致癌作用，使用時要多加小心，測定完數(shù)據(jù)后，收集反應(yīng)溶液，集中處理，不要流入下水道。
更多有關(guān)ELISA實驗的注意事項，請聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心