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肝癌類器官模型助力乙型肝炎病毒介導的m6A去甲基化增加肝細胞癌的干性

來源:愛必信(上海)生物科技有限公司   2024年05月13日 11:35  

介紹

 

近期,浙江大學醫(yī)學院傳染病診治國家重點實驗室刁宏燕老師課題組于2024年3月24 日發(fā)表在Molecular Cancer Research (IF:5.2)上題為“Hepatitis B Virus-mediated m6A demethylation increases hepatocellular carcinoma stemness and immune escape”的文章,借助肝細胞癌模型(HCC)及多種技術揭示了HBV通過在ALKBH5-YTHDF2依賴的條件下提高SNAI2的m6A修飾,促進HCC干細胞樣表型的維持,并增加免疫檢查點受體CD155的表達。

 

摘要

 

乙型肝炎病毒(HBV)持續(xù)感染在肝細胞癌(HCC)腫瘤發(fā)生中起著重要作用。許多研究揭示了多種癌癥中N6-甲基腺苷(m6A)的關鍵作用,而HBV持續(xù)感染相關HCC中m6A的調節(jié)機制尚未闡明。在這里,課題組通過增強ALKBH5 mRNA的穩(wěn)定性,證明HBV在HBV陽性HCC中下調m6A修飾水平。更具體地說,課題組還發(fā)現ALKBH5 mRNA在HBV陽性HCC的干細胞維持和自我更新中是必需的,但在HBV陰性HCC中是不必要的。機制上,ALKBH5去除了SNAI2基因30個未翻譯區(qū)(UTR)的m6A修飾,防止YTHDF2在那里被識別,從而穩(wěn)定SNAI2轉錄本,從而促進HBV陽性HCC中的癌干細胞特性。此外,SNAI2的表達逆轉了降低ALKBH5后抑制干細胞特性的作用。此外,ALKBH5/SNAI2軸通過激活免疫檢查點受體CD155來加速腫瘤免疫逃避。課題組的研究揭示了ALKBH5作為HBV相關HCC的關鍵調節(jié)因子,能夠誘導SNAI2的m6A去甲基化,并鑒定了ALKBH5/SNAI2/YTHDF2軸在HBV感染過程中促進干細胞樣表型和免疫逃逸的功能。

 

材料和方法

 

細胞培養(yǎng)和組織標本獲取(HCC cells、Mouse Hepa1-6 cell line、NK-92MI cells)、PDX造模(HepG2.215 cells 和Hep3B cells)、Western blot分析、腫瘤球培養(yǎng)、多重免疫組化和定量分析、肝細胞癌類器官構建(HCC)、MeRIP-seq數據分析、NK-92MI細胞殺傷實驗、IHC和評分、統計分析。

 

結果

 

1、hbv陽性HCC細胞中m6A水平降低可增強干性維持

 

 

2、HBV增強ALKBH5 mRNA穩(wěn)定性,促進干細胞樣特性

 

 

3、在hbv陽性HCC中,ALKBH5是維持肝癌細胞自我更新所必需的因素

 

 

4、SNAI2是hbv陽性HCC中ALKBH5功能上重要的靶基因

 


 

5、30 UTR中alkbh5介導的m6A去甲基化通過ythdf2依賴途徑穩(wěn)定SNAI2 mRNA水平

 

 

6、SLUG參與alkbh5調控的hbv相關HCC的干細胞樣特性

 

 

7、LKBH5/SNAI2軸通過調節(jié)CD155促進腫瘤免疫逃避

 

 

結論

 

總的來說,課題組的結果顯示ALKBH5與SNAI2的轉錄物3'UTR互作進一步去甲基化m6A修飾,增強了SNAI2的穩(wěn)定性以維持其高表達和促進HBV相關HCC的干性維持和免疫逃逸。精確靶向ALKBH5的表達對hbv相關HCC的治療是至關重要的方法。

 

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