每年的5月8號是“世界卵巢癌日”，根據(jù)世界衛(wèi)生組織國際癌癥研究機構（IARC）發(fā)布的2020年全球癌癥發(fā)病數(shù)據(jù)報告顯示：2020年中國新發(fā)癌癥病例457萬例，其中男性248萬例，女性209萬例，2020年中國癌癥死亡病例為300萬例，其中男性182萬例，女性118萬例，在婦科三大腫瘤中卵巢癌的死亡率。

圖.2020年中國女性癌癥新發(fā)病例數(shù)類型

卵巢癌類器官（organoids）是指利用卵巢瘤細胞等在體外培養(yǎng)出的3D細胞培養(yǎng)物并具有一定的空間結構組織類似物。卵巢癌類器官可以作為疾病模型，相較于傳統(tǒng)2D疾病模型，其在闡明疾病的發(fā)展、穩(wěn)態(tài)性和發(fā)病機理等與體內環(huán)境更加接近，能作為卵巢癌治療、診斷和發(fā)病機制研究的理想試驗模型。

1、取材：標本離體后，盡快取材。采用無菌器械，保證無菌環(huán)境，將腫瘤組織放入含有5 mL的原代組織保存液的 15 mL 離心管中，4℃轉運。

2、清洗：在生物安全柜中取出樣品管，去除組織保存液，加入適量冷的添加有雙抗的 PBS，反復清洗后，去除 PBS。

3、重復清洗：重復第 2 步驟 3 次。

4、組織處理：去除 PBS緩沖液后，將組織塊移至10 cm含10 mL冷原代 組織保存液的無菌培養(yǎng)皿中，用無菌眼科顯微剪將組織剪碎（直徑約 0.5mm~1mm）。

5、重復清洗：使用常溫PBS，重復第2步驟3次。

6、收集組織碎片，加入組織消化液消化20~30 min，過70 μm篩網(wǎng)，收集卵巢癌細胞。

7、紅細胞裂解：加入10 mL紅細胞裂解緩沖液，室溫下在翹板搖床上搖10 min。

8、重復清洗：裂解完畢，使用常溫 DMEM/F12，重復第 2步驟3次。

9、類器官種板：調整細胞密度為2~3×106，與基質膠1:1均勻混合，將細胞混懸液以40-60 uL每孔種在24孔板中，37℃放置15~30 min，加入預熱的類器官培養(yǎng)液，每個孔 750 uL。

10、類器官培養(yǎng)：將培養(yǎng)板放在 37℃  CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),每2天更換培養(yǎng)液。加入培養(yǎng)液時，吸頭朝向側壁，緩慢加入。

11、類器官觀察：每天觀察類器官并拍照，了解初始類器官數(shù)量、增殖速 度、形態(tài)、微生物污染情況等。

圖.卵巢癌類器官不同周期培養(yǎng)結果（P為培養(yǎng)代次，d為培養(yǎng)時間）