近些年，隨著生物醫(yī)藥迅猛發(fā)展、疫情下細(xì)胞基因治療以及mRNA疫苗的相繼涌現(xiàn)，如何把控生物制品安全可靠，成為各國(guó)法規(guī)政府重視以及監(jiān)管的要點(diǎn)。支原體是一種比較常見但通常難以去除的污染類型，對(duì)于涉及細(xì)胞培養(yǎng)的生物制品工藝過程，法規(guī)要求“必須確保無支原體污染”。

在快速檢測(cè)方法（NAT，核酸擴(kuò)增技術(shù)）出現(xiàn)之前，傳統(tǒng)的培養(yǎng)法和指示細(xì)胞法因其檢測(cè)周期長(zhǎng)或靈敏度問題，致使企業(yè)生產(chǎn)或產(chǎn)品放行周期拉長(zhǎng)或者需要基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估對(duì)細(xì)胞原料進(jìn)行條件放行或者尋求其他替代方法。而隨著細(xì)胞基因治療的發(fā)展，行業(yè)內(nèi)對(duì)支原體檢測(cè)時(shí)效性和靈敏度要求越來越高，短的貨架期不足以支撐如此長(zhǎng)的檢測(cè)周期，因此NAT方法從眾多支原體檢測(cè)方法中脫穎而出。

目前歐洲藥典（EP）<2.6.7>，日本藥典（JP）以及美國(guó)藥典（USP）<63>都已收錄NAT方法作為支原體檢測(cè)方法，但需要對(duì)該方法進(jìn)行驗(yàn)證以及與傳統(tǒng)方法進(jìn)行對(duì)比其檢測(cè)靈敏度不低于傳統(tǒng)方法，才可以使用。2020版中國(guó)藥典（ChP）雖然并未收錄NAT法作為支原體檢測(cè)方法，但其中也提到了“也可采用經(jīng)國(guó)家藥品檢定機(jī)構(gòu)認(rèn)可的其他方法”。2022年5月，國(guó)家藥監(jiān)局藥審中心發(fā)布的《免疫細(xì)胞治療產(chǎn)品藥學(xué)研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》中提到“當(dāng)檢驗(yàn)樣品量有限，或需要快速放行等特殊情況下，如藥典方法無法滿足，可考慮開發(fā)新型的無菌和支原體的檢測(cè)方法進(jìn)行放行檢測(cè)，但是新型檢測(cè)方法應(yīng)經(jīng)過充分驗(yàn)證”。所以NAT法有望作為能夠支持快速支原體放行檢測(cè)的方法，被越來越多的原材料供應(yīng)商、以及ATMP企業(yè)所使用。

翌圣生物NAT法支原體qPCR檢測(cè)

翌圣生物MycAway™支原體qPCR檢測(cè)試劑盒(探針法)能夠與MolPure®磁珠法殘留DNA樣本前處理試劑盒搭配使用，可以通過手動(dòng)提取或者使用自動(dòng)化核酸提取儀自動(dòng)提取樣本核酸。樣本經(jīng)過前處理去除干擾雜質(zhì)獲得純化的支原體DNA后，通過qPCR收集探針的熒光信號(hào)，從而對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判定。