將RRBC加入正常人血清中,可使B因子活化,激活補體旁路途徑致使BRBC溶解。將正常人新鮮血清加熱使B因子喪失活性(簡稱RB),旁路途徑不能激活,當加入RRBC時不發(fā)生溶血。此時再加入含有B因子的待測血清,旁路途徑即被激活,RRBC發(fā)生溶血反應(yīng)。根據(jù)溶血程度可測定待測血清中B因子的活性。
1.RRBC懸液制備(見ACH50測定)。
2.RB的制備 取新鮮正常人混合血清(3人以上),56℃水浴加熱15min,滅活其中B因子,新鮮使用或分裝后凍干保存。
3.取一定稀釋度的受檢血清與一定量的RB和1%RRBC懸液混合,置37℃水浴30min,離心,取上清用分光光度計429nm讀取吸光度(A)值,以參考血清A值作為100%進行換算,低于60%者判定為B因子溶血活性降低。
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