国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>其他文章>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

大腸桿菌表達(dá)與純化服務(wù)——艾柏森生物

來源:安諾倫(北京)生物科技有限公司   2024年06月18日 11:25  


 

大腸桿菌表達(dá)與純化服務(wù)是生物技術(shù)領(lǐng)域中的一項(xiàng)重要服務(wù),它涉及到利用大腸桿菌(Escherichia coli,簡稱E. coli)作為宿主細(xì)胞,來表達(dá)和生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。這一過程包括多個步驟,從基因克隆、表達(dá)載體構(gòu)建、轉(zhuǎn)化、誘導(dǎo)表達(dá),到最終的蛋白純化和驗(yàn)證。以下是對大腸桿菌表達(dá)與純化服務(wù)的詳細(xì)介紹:

1. 基因克隆

基因克隆是表達(dá)蛋白的第一步,需要將目標(biāo)基因從其原始來源中提取出來,并將其插入到適合在大腸桿菌中表達(dá)的載體中。這一步驟通常涉及到PCR擴(kuò)增、限制性內(nèi)切酶消化、連接酶連接等分子生物學(xué)技術(shù)。

2. 表達(dá)載體構(gòu)建

構(gòu)建表達(dá)載體是將目標(biāo)基因插入到特定的質(zhì)?;蚴删w載體中,這些載體含有啟動子、終止子、抗性標(biāo)記等必要的元件,以確?;蛟诖竽c桿菌中得到有效表達(dá)。

3. 轉(zhuǎn)化

轉(zhuǎn)化是將構(gòu)建好的表達(dá)載體轉(zhuǎn)移到大腸桿菌宿主細(xì)胞中的過程。通過熱激、電穿孔或化學(xué)方法,使大腸桿菌細(xì)胞膜的通透性增加,從而允許外源DNA進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。

4. 誘導(dǎo)表達(dá)

在大腸桿菌中,基因的表達(dá)通常是通過誘導(dǎo)劑來控制的。常用的誘導(dǎo)劑包括IPTG(異丙基-β-D-硫代半乳糖苷)、阿拉伯糖等。通過添加這些誘導(dǎo)劑,可以激活啟動子,從而驅(qū)動目標(biāo)基因的表達(dá)。

5. 細(xì)胞培養(yǎng)

目標(biāo)蛋白的表達(dá)需要在適宜的條件下進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。這包括選擇合適的培養(yǎng)基、溫度、pH值和溶氧量等,以確保大腸桿菌的生長和目標(biāo)蛋白的表達(dá)。

6. 蛋白提取

蛋白提取是將表達(dá)的蛋白從細(xì)胞中釋放出來的過程。這通常涉及到細(xì)胞裂解,可以使用機(jī)械裂解、化學(xué)裂解或酶解等方法。

7. 蛋白純化

蛋白純化是分離目標(biāo)蛋白,去除雜質(zhì)的過程。常用的純化方法包括親和層析、離子交換層析、凝膠過濾層析和反向相層析等。

8. 蛋白驗(yàn)證

純化后的蛋白需要進(jìn)行驗(yàn)證,以確保其正確折疊、活性和純度。常用的驗(yàn)證方法包括SDS-PAGE電泳、Western blot、質(zhì)譜分析和活性測定等。

9. 服務(wù)優(yōu)勢

大腸桿菌表達(dá)與純化服務(wù)具有多個優(yōu)勢,包括成本效益高、操作簡單、表達(dá)量高、可快速獲得結(jié)果等。此外,大腸桿菌的快速繁殖能力使其成為大規(guī)模生產(chǎn)重組蛋白的理想選擇。

10. 應(yīng)用領(lǐng)域

大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于生物制藥、疫苗開發(fā)、生物材料、酶工程和基礎(chǔ)研究等領(lǐng)域。

總結(jié)來說,大腸桿菌表達(dá)與純化服務(wù)是一項(xiàng)在生物技術(shù)領(lǐng)域中具有廣泛應(yīng)用的技術(shù),它通過一系列精細(xì)的操作步驟,能夠高效地生產(chǎn)和純化目標(biāo)蛋白,為科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用提供了強(qiáng)有力的支持。

 


免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
张掖市| 乐亭县| 山阴县| 满洲里市| 丹东市| 沈阳市| 乌兰察布市| 陇南市| 栾城县| 台北县| 都兰县| 鄄城县| 两当县| 阳高县| 邹城市| 凌源市| 嘉鱼县| 铜川市| 平谷区| 扬中市| 都江堰市| 车险| 新宾| 门源| 凌海市| 明光市| 葫芦岛市| 缙云县| 洪泽县| 乡宁县| 河北区| 长白| 和平区| 根河市| 铜川市| 舞阳县| 翼城县| 宁乡县| 高雄县| 固阳县| 石狮市|