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肝缺血(HI)大鼠模型科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹

來源:世聯(lián)博研(北京)科技有限公司   2024年06月27日 14:25  

肝缺血(HI)大鼠模型


動(dòng)物品系:SD大鼠,SPF級(jí),健康,雄性,體重:200g~220g


實(shí)驗(yàn)分六組:空白對(duì)照組、模型組、陽性藥物組、受試藥物低、中、高劑量組


實(shí)驗(yàn)周期:72h


造模方法:缺血再灌注


1.大鼠行術(shù)前12 h禁食,自由飲水。


2.腹腔注射麻醉,麻醉成功后將大鼠平躺在手術(shù)臺(tái)上膠帶固定四肢,將大鼠腹部至劍突術(shù)區(qū)剃毛 ,術(shù)區(qū)消毒。


3.取腹正中切口1cm,打開腹腔,小心分離出肝臟左、中葉之肝蒂(左、中葉肝臟供血的門靜脈和肝動(dòng)脈)。


4. 用無創(chuàng)血管夾夾閉中葉和左葉的門靜脈和肝動(dòng)脈,使約70%的肝臟缺血,以防止發(fā)生嚴(yán)重腸系膜靜脈淤血。0.5min后,與非阻斷的右葉相比,肉眼可見阻斷葉明顯變白,說明阻斷成功,用止血鉗夾閉皮膚切口臨時(shí)關(guān)閉腹腔,同時(shí)將大鼠放在37℃恒溫加熱墊上保溫。


5. 完成持續(xù)缺血60min后,重新打開腹腔,迅速取出血管夾,恢復(fù)缺血肝血流,0.5min左右可見缺血區(qū)肝臟由白色逐漸恢復(fù)為鮮紅色表明再灌注成功,逐層縫合腹腔肌肉和皮膚關(guān)閉腹腔,完成手術(shù)。待大鼠清醒后放回飼養(yǎng)室飼養(yǎng),密切關(guān)注大鼠的狀態(tài)及生存狀況并做好記錄。


6. 術(shù)后分別于再灌注0h、3h、6h、12h、24h及72h處死大鼠,下腔靜脈取血1ml,室溫靜置2h后于4℃3000r離心10分鐘提取血清,放入-80冰箱凍存。采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中ALT(谷丙轉(zhuǎn)氨酶)、AST(天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)的水平。同時(shí)統(tǒng)一取肝左葉組織1.5cm×1cm×0.2cm留作病理標(biāo)本或分生標(biāo)本。




注意事項(xiàng)


1.分離肝門時(shí)用棉簽分離,可避免對(duì)肝臟的損傷


2.術(shù)前禁食有利于手術(shù)進(jìn)行


3.阻斷血流要一次成功,否則會(huì)造成缺血預(yù)處理,減輕損傷程度


4.再灌后用棉簽輕輕按壓肝臟,有利于血流恢復(fù)


5.取材時(shí)鑷子不要損傷肝臟



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