細(xì)胞增殖,可能會(huì)發(fā)生許多刺激如細(xì)胞因子的曝光或多種其他進(jìn)程。BD有一個(gè)新的產(chǎn)品,以幫助研究人員研究細(xì)胞增殖???紫擴(kuò)散染料450,用于檢測(cè)細(xì)胞的增殖與紫色激光,這有利于使用較大的面板。這使得更多的數(shù)據(jù)從有限樣本使用多色流式細(xì)胞儀測(cè)定。
VPD450是一個(gè)非熒光酯化染料。酯基使染料進(jìn)入細(xì)胞。一旦染料是在細(xì)胞內(nèi)的酯酶裂開(kāi)關(guān)閉酯基的染料轉(zhuǎn)換成熒光的產(chǎn)品,它在細(xì)胞內(nèi)和陷阱。復(fù)制事件與每個(gè)單元格中的染料量下降,導(dǎo)致的特征模式。 的進(jìn)行一系列設(shè)計(jì)用于增殖細(xì)胞的檢測(cè)通過(guò)測(cè)量溴脫氧尿苷(BrdU)標(biāo)記,用于測(cè)量從頭DNA合成的DNA前體胸腺嘧啶核苷類似物的抗體和試劑盒。
工具和技術(shù)來(lái)研究細(xì)胞增殖過(guò)程中的細(xì)胞周期的S期(DNA合成)的BrdU結(jié)合到新合成的DNA,并可以很容易地檢測(cè)到抗BrdU特異性抗體。BD的BrdU檢測(cè)而設(shè)計(jì)的抗體和試劑盒可用于兩種細(xì)胞的流式細(xì)胞儀和免疫組化,包括BD地平線?V450和PERCP-CY?5.5格式。除了增加的DNA,某些蛋白質(zhì)水平作為細(xì)胞增殖的結(jié)果也隨之上升。例如,Ki67的是在細(xì)胞核分裂細(xì)胞表達(dá)的抗原。然而,在G0期的細(xì)胞周期,它是未檢出。Ki67蛋白可以結(jié)合其他增殖標(biāo)志物,如以增加信心的BrdU和VPD450。這些標(biāo)記也可以結(jié)合細(xì)胞表面和其他類型的標(biāo)記,獲得細(xì)胞亞群,其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑有關(guān)的其他信息。
隨著細(xì)胞的損壞或不再需要時(shí),它們經(jīng)受細(xì)胞凋亡或程序性細(xì)胞死亡過(guò)程中發(fā)生的胚胎發(fā)育和維持組織穩(wěn)態(tài)正常的生理過(guò)程。
細(xì)胞凋亡是一個(gè)有組織的過(guò)程,標(biāo)志著細(xì)胞自毀的細(xì)胞更新,或控制的異常細(xì)胞的生長(zhǎng)。凋亡控制有序受損細(xì)胞死亡的壞死,而發(fā)生的組織損傷的結(jié)果,造成損壞和周圍的細(xì)胞的損失。
細(xì)胞凋亡過(guò)程的特點(diǎn)是某些形態(tài)特征。這些措施包括在質(zhì)膜中的變化(如對(duì)稱膜和膜附著喪失的損失),細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核的縮合,蛋白質(zhì)裂解和體間的DNA裂解。在最后階段的過(guò)程中,死亡的細(xì)胞變得支離破碎“凋亡小體”,并因此被淘汰被吞噬細(xì)胞周圍的細(xì)胞沒(méi)有明顯的炎癥損傷。
然而,某些類型的細(xì)胞不顯示細(xì)胞凋亡的特征。在這些情況下,可能需要進(jìn)行分析,以確認(rèn)細(xì)胞死亡機(jī)制的細(xì)胞凋亡的多個(gè)方面。
技術(shù)研究凋亡細(xì)胞程序性死亡為了支持這個(gè)頻譜的要求, 提供的凋亡檢測(cè)工具和技術(shù)測(cè)量指標(biāo)在細(xì)胞凋亡過(guò)程的不同階段跨越。 的工具,使用多種方法,包括流式細(xì)胞儀,生物成像和顯微(直播和固定細(xì)胞分析)以及ELISA,免疫組化,免疫印跡,熒光分光光度法。
AnnexinV的一個(gè)關(guān)鍵蛋白在細(xì)胞凋亡信號(hào)在質(zhì)膜中的變化是在活細(xì)胞中檢測(cè)到的細(xì)胞凋亡過(guò)程的特征之一。細(xì)胞凋亡可以被檢測(cè)到的存在的磷脂酰絲氨酸(PS),這通常是位于質(zhì)膜的胞質(zhì)面。細(xì)胞凋亡過(guò)程中PS轉(zhuǎn)位到質(zhì)膜外單張,并通過(guò)熒光標(biāo)記的AnnexinV的結(jié)合鈣存在時(shí),通過(guò)流式細(xì)胞儀和細(xì)胞成像可以檢測(cè)。
提供AnnexinV的幾種常見(jiàn)的格式,如FITC,PE和BD地平線?V450紫激光。此外,這些新格式,可開(kāi)發(fā)更復(fù)雜的分析,看異構(gòu)細(xì)胞亞群內(nèi)的細(xì)胞凋亡。
由于細(xì)胞內(nèi)的膜聯(lián)蛋白V如果質(zhì)膜受到損害,也暴露,如7-AAD的膜-浸透染料是常用來(lái)區(qū)分凋亡細(xì)胞和死細(xì)胞,死細(xì)胞排除。人口與膜聯(lián)蛋白V染色的細(xì)胞,僅代表細(xì)胞凋亡的細(xì)胞群。
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