色譜過程的本質(zhì)是待分離物質(zhì)分子在固定相和流動(dòng)相之間分配平衡的過程,不同的物質(zhì)在兩相之間的分配會(huì)不同,這使其隨流動(dòng)相運(yùn)動(dòng)速度各不相同,隨著流動(dòng)相的運(yùn)動(dòng),混合物中的不同組分在固定相上相互分離。
根據(jù)物質(zhì)的分離機(jī)制,又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類別。
吸附色譜利用固定相吸附中心對(duì)物質(zhì)分子吸附能力的差異實(shí)現(xiàn)對(duì)混合物的分離,吸附色譜的色譜過程是流動(dòng)相分子與物質(zhì)分子競(jìng)爭(zhēng)固定相吸附中心的過程
吸附色譜的分配系數(shù)表達(dá)式如下:
K_a =\frac{[X_a]}{[X_m]}
其中[Xa]表示被吸附于固定相活性中心的組分分子含量,[Xm]表示游離于流動(dòng)相中的組分分子含量。分配系數(shù)對(duì)于計(jì)算待分離物質(zhì)組分的保留時(shí)間有很重要的意義。
分配色譜利用固定相與流動(dòng)相之間對(duì)待分離組分溶解度的差異來實(shí)現(xiàn)分離。分配色譜的固定相一般為液相的溶劑,依靠圖布、鍵合、吸附等手段分布于色譜柱或者擔(dān)體表面。分配色譜過程本質(zhì)上是組分分子在固定想和流動(dòng)相之間不斷達(dá)到溶解平衡的過程。
分配色譜的狹義分配系數(shù)表達(dá)式如下:
K=\frac=\frac{X_s/V_s}{X_m/V_m}
式中Cs代表組分分子在固定相液體中的溶解度,Cm代表組分分子在流動(dòng)相中的溶解度。
離子色譜分析法出現(xiàn)在20世紀(jì)70年代,80年代迅速發(fā)展起來,以無機(jī)、特別是無機(jī)陰離子混合物為主要分析對(duì)象。
離子交換色譜利用被分離組分與固定相之間發(fā)生離子交換的能力差異來實(shí)現(xiàn)分離。離子交換色譜的固定相一般為離子交換樹脂,樹脂分子結(jié)構(gòu)中存在許多可以電離的活性中心,待分離組分中的離子會(huì)與這些活性中心發(fā)生離子交換,形成離子交換平衡,從而在流動(dòng)相與固定相之間形成分配。固定相的固有離子與待分離組分中的離子之間相互爭(zhēng)奪固定相中的離子交換中心,并隨著流動(dòng)相的運(yùn)動(dòng)而運(yùn)動(dòng),zui終實(shí)現(xiàn)分離。
離子交換色譜的分配系數(shù)又叫做選擇系數(shù),其表達(dá)式為:
K_s=\frac{[RX^+]}{[X^+]}
其中[RX + ]表示與離子交換樹脂活性中心結(jié)合的離子濃度,[X + ]表示游離于流動(dòng)相中的離子濃度。
凝膠色譜的原理比較特殊,類似于分子篩。待分離組分在進(jìn)入凝膠色譜后,會(huì)依據(jù)分子量的不同,進(jìn)入或者不進(jìn)入固定相凝膠的孔隙中,不能進(jìn)入凝膠孔隙的分子會(huì)很快隨流動(dòng)相洗脫,而能夠進(jìn)入凝膠孔隙的分子則需要更長(zhǎng)時(shí)間的沖洗才能夠流出固定相,從而實(shí)現(xiàn)了根據(jù)分子量差異對(duì)各組分的分離。調(diào)整固定相使用的凝膠的交聯(lián)度可以調(diào)整凝膠孔隙的大?。桓淖兞鲃?dòng)相的溶劑組成會(huì)改變固定相凝膠的溶漲狀態(tài),進(jìn)而改變孔隙的大小,獲得不同的分離效果。
根據(jù)物質(zhì)的分離機(jī)制,又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類別。
吸附色譜
分配色譜
分配色譜利用固定相與流動(dòng)相之間對(duì)待分離組分溶解度的差異來實(shí)現(xiàn)分離。分配色譜的固定相一般為液相的溶劑,依靠圖布、鍵合、吸附等手段分布于色譜柱或者擔(dān)體表面。分配色譜過程本質(zhì)上是組分分子在固定想和流動(dòng)相之間不斷達(dá)到溶解平衡的過程。
離子交換色譜
凝膠色譜
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