GSK3α檢測試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗GSK3Α檢測試劑盒抗體包被于酶標(biāo)板上，實(shí)驗(yàn)時樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的GSK3Α檢測試劑盒與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗GSK3Α檢測試劑盒抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素?？?span style="font-family: Calibri;">GSK3Α檢測試劑盒抗體與結(jié)合在包被抗體上的GSK3Α檢測試劑盒結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色，加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值，GSK3Α檢測試劑盒濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中GSK3Α檢測試劑盒的濃度。

艾美捷GSK3α檢測試劑盒：

貨號：BPS-79698

同義詞：糖原合酶激酶3α，GSK-3α，絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶GSK3A

檢測試劑盒格式：發(fā)光型

物種：人類

未提供所需材料：

Kinase-Glo® Max檢測試劑（Promega #V6071）

二硫蘇糖醇（DTT，1 M；可選）

能夠讀取發(fā)光的微孔板閱讀器

可調(diào)節(jié)的微量移液器和無菌吸頭

30°C恒溫箱

UniProt編號 ：#P49840

儲存/穩(wěn)定性：按照推薦條件儲存，可保存長達(dá)6個月。

運(yùn)輸溫度：-80°C

禁忌：保持最終DMSO濃度低于1%

警告：避免多次凍融循環(huán)。

免責(zé)聲明和限制：BPS Bioscience檢測試劑盒是根據(jù)我們特定的協(xié)議，使用列出的組分進(jìn)行驗(yàn)證的。任何對試劑盒組分或協(xié)議的偏差，如使用不同的蛋白質(zhì)、細(xì)胞/組織裂解物或緩沖液（包括使用其他商業(yè)來源的相同組分），將使試劑盒的性能保證無效，并且不推薦使用。

科學(xué)類別：激酶

監(jiān)管狀態(tài)：僅限研究使用

GSK3α檢測試劑盒格式：

*GSK3α的濃度具有批次特異性，將在含有酶的試管上顯示。

文獻(xiàn)參考：

McCubrey JA., et al. Oncotarget 5(10): 2881-2911 (2014)

GSK3α檢測試劑盒靈敏度、檢測范圍、特異性和重復(fù)性:

靈敏度：最小可測：0.227ng/mL

檢測范圍：0.625-40ng/mL

特異性：可檢測重組或天然的大鼠GSK3Α檢測試劑盒，且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。

重復(fù)性：板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。

GSK3Α檢測試劑盒樣品收集：

1. 血清：全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。

2. 血漿：抗凝劑推薦使用EDTA-Na2，樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂樣品。

3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：取細(xì)胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘，除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清檢測。

5. 其它生物樣品：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測

6. 樣品應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。

7. 樣品收集后若在1周內(nèi)進(jìn)行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃(1個月內(nèi)檢測)，或-80℃（6個月內(nèi)檢測），避免反復(fù)凍融。

8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品最高值，請根據(jù)實(shí)際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋（建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定稀釋倍數(shù)）。