紫外可見分光光度計(jì)作為一種常用的分析儀器,在化學(xué)、生物、環(huán)境等多個(gè)領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用于定量分析。其定量分析方法主要包括以下幾種:
1.絕對(duì)法
絕對(duì)法是基于比耳定律(A=εbC)的分析方法。在某一特定波長(zhǎng)下,物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)ε是一個(gè)常數(shù),而石英比色皿的光程b也是已知的。因此,通過測(cè)定樣品溶液的吸光度A,可以計(jì)算出樣品溶液的濃度C(C=A/εb)。這種方法在紫外可見分光光度計(jì)的分析中較為常用,因?yàn)樗苯油ㄟ^物理定律建立了濃度與吸光度之間的關(guān)系。
2.標(biāo)準(zhǔn)法
標(biāo)準(zhǔn)法是在相同的測(cè)試條件下,分別測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液和被測(cè)樣品溶液的吸光度。通過比較兩者的吸光度值,并利用已知的標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液的濃度,可以計(jì)算出被測(cè)樣品溶液的濃度。這種方法依賴于標(biāo)準(zhǔn)樣品的準(zhǔn)確性和測(cè)試條件的一致性。
3.標(biāo)準(zhǔn)曲線法
標(biāo)準(zhǔn)曲線法是紫外可見分光光度計(jì)常用的定量分析方法之一。它首先用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)配制一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,并在一定波長(zhǎng)下測(cè)定每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。然后,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。在相同條件下測(cè)定待測(cè)樣品的吸光度后,即可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找到對(duì)應(yīng)的濃度值。這種方法具有操作簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確可靠的優(yōu)點(diǎn)。
4.其他方法
除了上述三種常用方法外,還有比吸收系數(shù)法、最小二乘法、解聯(lián)立方程法和示差分光光度法等。然而,這些方法在實(shí)際應(yīng)用中相對(duì)較少見,或者由于某些限制條件(如樣品濃度范圍、儀器精度等)而不太常用。
綜上所述,紫外可見分光光度計(jì)的定量分析方法多種多樣,但絕對(duì)法、標(biāo)準(zhǔn)法和標(biāo)準(zhǔn)曲線法因其簡(jiǎn)便性和準(zhǔn)確性而在實(shí)際應(yīng)用中最為廣泛。在選擇具體方法時(shí),需要根據(jù)樣品的性質(zhì)、分析目的以及儀器條件等因素進(jìn)行綜合考慮。
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