PluriSelect-10倍紅細(xì)胞裂解緩沖液100ml的應(yīng)用說(shuō)明
PluriSelect-紅細(xì)胞(RBC)裂解緩沖液經(jīng)過(guò)精心設(shè)計(jì)、配方制定和測(cè)試,以確保在單細(xì)胞懸浮液中對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行Z佳裂解,同時(shí)對(duì)白細(xì)胞的影響Z小。有核紅細(xì)胞不能通過(guò)氯化銨有效裂解。這種1倍濃度的紅細(xì)胞裂解緩沖液已經(jīng)準(zhǔn)備好使用。
艾美捷PluriSelect-10倍紅細(xì)胞裂解緩沖液(100ml):
貨號(hào) 60-00051
規(guī)格 100 ml
感興趣的領(lǐng)域 細(xì)胞生物學(xué)
不育癥 無(wú)菌型
相位范圍 pH 7.4
運(yùn)輸條件 Room Temperature
儲(chǔ)存條件 4-8 °C
規(guī)范性聲明 For research use only. Not for use in diagnostic procedures
PluriSelect-10倍紅細(xì)胞裂解緩沖液組分:
氯化銨 (NH4 Cl) (1550毫摩爾/升)
碳酸氫鉀 (KHCO3) (100毫摩爾/升)
乙二胺四乙酸 (EDTA) (1毫摩爾/升)
PluriSelect-10倍紅細(xì)胞裂解緩沖液應(yīng)用說(shuō)明:
人外周血和骨髓紅細(xì)胞的裂解
1、將10倍紅細(xì)胞裂解緩沖液用去離子水稀釋至1倍工作濃度。使用前將1倍溶液預(yù)熱至室溫。
2、對(duì)于全血裂解,使用樣本體積20倍的1倍紅細(xì)胞裂解緩沖液體積,例如,向含有Z多100微升全血的管中加入2.0毫升的1倍紅細(xì)胞裂解緩沖液。
3、在加入裂解溶液后立即輕輕旋動(dòng)每個(gè)管。在冰上或冰箱(4°C)中避光孵育10-15分鐘。
4、以350 x g離心10分鐘。丟棄上清液,不要攪動(dòng)沉淀物。
5、在適當(dāng)?shù)木彌_液中重新懸浮沉淀物(例如PBS或洗滌緩沖液),洗滌1次。
6、重新懸浮并繼續(xù)進(jìn)行進(jìn)一步的程序。
小鼠脾臟紅細(xì)胞的裂解
1、收獲小鼠脾臟并準(zhǔn)備單細(xì)胞懸浮液。
2、通過(guò)離心(350 x g)使細(xì)胞沉淀;吸去上清液。
3、將10倍紅細(xì)胞裂解緩沖液用去離子水稀釋至1倍工作濃度,并在5毫升1倍裂解緩沖液中重新懸浮沉淀物。
4、在冰上或冰箱(4°C)中孵育4-5分鐘,偶爾搖動(dòng)。
5、通過(guò)向裂解緩沖液中加入20-30毫升1倍PBS來(lái)終止反應(yīng)。
6、離心細(xì)胞(350 x g)并丟棄上清液。
7、在適當(dāng)?shù)木彌_液中重新懸浮沉淀物(例如PBS(目錄號(hào))或洗滌緩沖液(目錄號(hào))),洗滌1次。
8、計(jì)數(shù)細(xì)胞,調(diào)整密度,并繼續(xù)進(jìn)行細(xì)胞分離或細(xì)胞染色程序。
艾美捷科技是pluriSelect的特約代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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