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三維(3D)凝膠制備方法

來源:北京博蕾德科技發(fā)展有限公司   2024年08月12日 14:40  

三維(3D)凝膠制備方法

背景簡介:

膠原蛋白是脊椎動物體內(nèi)豐富的蛋白質(zhì),存在于皮膚、軟骨、骨、椎間盤、血管、肌腱、韌帶和角膜中,是細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的主要成分。I型膠原由兩條相同的α1鏈和一條不同的α2鏈(1)組成,形成稱為原膠原的三螺旋結(jié)構(gòu)。這種三螺旋構(gòu)象增加了組織的結(jié)構(gòu)強度和抗酶降解能力,在形成細(xì)胞外基質(zhì)過程中起著關(guān)鍵作用。

膠原蛋白有助于促進組織再生和/或靶向藥物釋放,因為它具有低抗原性,低毒、高水溶性、高生物降解性。I型膠原結(jié)合整合素,促進細(xì)胞遷移、附著以及增殖和分化。盡管通過胃蛋白酶消化從原膠原中去除N-C-末端原膠原被廣泛用于工業(yè)用途,但原膠原作為含有交聯(lián)末端肽的天然膠原支架可能是有益的。

Chondrex公司提供酸性I型原膠原溶液,可用于傳統(tǒng)的二維(2D)系統(tǒng)以及三維(3D)凝膠中的支架,用于模擬成纖維細(xì)胞和軟骨細(xì)胞中的細(xì)胞生長。

品牌

Chondrex

貨號

1203

產(chǎn)品名稱

可溶性I型膠原

應(yīng)用

用于傳統(tǒng)的二維(2D)系統(tǒng)以及三維(3D)凝膠中的支架,用于模擬成纖維細(xì)胞和軟骨細(xì)胞中的細(xì)胞生長。

規(guī)格

4 mg/ml x 12.5 ml (sterile filtered)

形態(tài)

溶于0.01M HCL

來源

內(nèi)毒素

1 EU/ml

純度

95% I 膠原

保存

4

穩(wěn)定性

6

操作流程

包被(注:具體的包被的條件需要根據(jù)培養(yǎng)系統(tǒng)優(yōu)化

1.0.02mol/L的鹽酸稀釋4mg/ml的膠原到50-100ug/ml。

2.溫和混勻稀釋后的溶液。

3.取適量的稀釋后的膠原加入孔內(nèi)或板內(nèi)。

注:保證整個表面都是包被的。

4. 37℃或室溫孵育1-2小時

5. 棄掉所有溶液。

6.用培養(yǎng)基或者PBS漂洗包被表面。

7.包被好的孔或板2-8℃保存或者空氣中晾干(如果保持無菌)

三維凝膠制備流程:

  1. PBS等體積稀釋膠原溶液,終濃度2mg/ml。

  2. 加入適量的稀釋后的膠原到孔內(nèi)或板內(nèi)。

  3. 37℃孵育30~60分鐘。

  4. 凝膠可以2-8℃保存或者空氣中晾干(如果保持無菌)。


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