手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
Ceturegel基質(zhì)膠應(yīng)用-胰腺癌類器官構(gòu)建流程！
2024年4月4日CA: A Cancer Journal for Clinicians期刊發(fā)布了最新的2022年全球癌癥數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。根據(jù)世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）的最新評(píng)估數(shù)據(jù)，2022年全球癌癥新增病例1996萬(wàn)例，全球癌癥死亡病例974萬(wàn)例。2022年癌癥死亡病例數(shù)的癌癥分別是肺癌（182萬(wàn)，18.7%）、結(jié)直腸癌（90萬(wàn)，9.3%）、肝癌（76萬(wàn)，7.8%）、女性乳腺癌（67萬(wàn)，6.9%） 、胃癌（66萬(wàn)，6.8%）、胰腺癌（47萬(wàn)，4.8%）、食道癌（44.5萬(wàn)，4.6%）、前列腺癌（40萬(wàn)，4.1%）、宮頸癌（35萬(wàn)，3.6%）、白血?。?0.5萬(wàn)，3.1%）。
圖.2022年全球癌癥的病例和死亡分布類型
其中胰腺癌是一種惡性度高、治療效果差的腫瘤，胰腺癌的五年生存率約為10%，被醫(yī)學(xué)界稱為“癌中王”。但是并非不能治療，對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)的胰腺癌，可以通過(guò)性手術(shù)結(jié)合術(shù)后化療、放療等綜合治療。因此針對(duì)不同病人找到合適的治療藥物是關(guān)鍵所在。
胰腺癌類器官（organoids）是指利用胰腺瘤細(xì)胞等在體外培養(yǎng)出的3D細(xì)胞培養(yǎng)物并具有一定的空間結(jié)構(gòu)組織類似物。胰腺癌類器官可以作為疾病模型，相較于傳統(tǒng)2D疾病模型，其在闡明疾病的發(fā)展、穩(wěn)態(tài)性和發(fā)病機(jī)理等與體內(nèi)環(huán)境更加接近，能作為胰腺癌治療、診段和發(fā)病機(jī)制研究的理想試驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/span>
胰腺癌類器官構(gòu)建實(shí)驗(yàn)步驟
清洗：在生物安全柜中取出樣品管，去除組織保存液，加入適量冷的添加有雙抗的 PBS，反復(fù)清洗后，去除 PBS；
重復(fù)清洗：使用常溫PBS，重復(fù)第2步驟3次；
收集組織碎片，加入組織消化液消化，因胰腺癌組織較硬，消化需要時(shí)間30 min，重復(fù)2-3次，過(guò)70 μm篩網(wǎng)，收集胰腺癌細(xì)胞；
紅細(xì)胞裂解：加入10 mL紅細(xì)胞裂解緩沖液，室溫下在翹板搖床上搖10 min；
重復(fù)清洗：裂解完畢，使用常溫 DMEM/F12，重復(fù)第 2步驟3次；
類器官種板：調(diào)整細(xì)胞密度為2~3×106，與Ceturegel基質(zhì)膠1:1均勻混合，將細(xì)胞混懸液以40-60 uL每孔種在24孔板中，37℃放置15~30 min，加入預(yù)熱的類器官培養(yǎng)液，每個(gè)孔 750 uL；
類器官培養(yǎng)：將培養(yǎng)板放在 37℃ CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每2天更換培養(yǎng)液。加入培養(yǎng)液時(shí)，吸頭朝向側(cè)壁，緩慢加入；
重復(fù)清洗：使用常溫PBS，重復(fù)第2步驟3次；類器官觀察：每天觀察類器官并拍照，了解初始類器官數(shù)量、增殖速 度、形態(tài)、微生物污染情況等。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖.胰腺癌組織（上圖）和癌旁（下圖）類器官不同周期培養(yǎng)結(jié)果（P為培養(yǎng)代次，d為培養(yǎng)時(shí)間）
FAQ
基質(zhì)膠的操作要注意哪些事項(xiàng)？
所有操作需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，應(yīng)使用預(yù)冷的移液器以保證基質(zhì)膠呈勻漿狀。
獲取臨床樣本，如何避免污染？
①取材時(shí)盡量保證無(wú)菌取材；
②提取前可以用含雙抗的PBS浸泡幾分鐘：常見(jiàn)與外界環(huán)境有接觸可能的胃、腸、膀胱等位置腫瘤建議用含3%~5%雙抗的PBS浸泡5-10 min，其他常見(jiàn)腫瘤用含1%~2%雙抗的PBS浸泡5min左右；
③提取細(xì)胞過(guò)程中所用試劑均加1%雙抗及合適濃度的原代抗生素。
腫瘤組織采集、保存、運(yùn)輸注意事項(xiàng)
盡可能多采集腫瘤細(xì)胞含量高的腫瘤組織，并縮短組織樣本在空氣中暴露的時(shí)間，以減少污染概率；采集的腫瘤組織樣本盡快置于裝有專用樣本保存液的無(wú)菌管中，低溫（4 ℃左右）下快速運(yùn)轉(zhuǎn)至檢測(cè)單位（盡量保證采樣后2~4 h內(nèi)送到）。
病灶和癌旁培養(yǎng)出的類器官有區(qū)別嗎？腫瘤組織的取材部位有什么要求？
有差別，腫瘤本身具有異質(zhì)性，不同來(lái)源的類器官之間存在差異是很常見(jiàn)的現(xiàn)象，從形態(tài)上看，原發(fā)病灶來(lái)源的類器官比癌旁來(lái)源的類器官更具有侵襲性的結(jié)構(gòu)，一般病灶形態(tài)上更加不規(guī)則一些。如果希望在建?；蛩幬锖Y選方面盡量減小誤差，可以在活性好的地方多位置取樣。
產(chǎn)品選擇
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
Cebrary®Tissue Digestion Solution 組織消化液 | 41423ES10/30 | 10/30 mL |
Cebrary®Cell recovery solution for Organoid類器官回收液 | 41421ES30/60 | 30/100 mL |
Cebrary®Cell freezing medium for Organoid 類器官凍存液 | 41422ES30/60 | 30/100 mL |
Cebrary® Pancreatic Cancer Organoid Growth Medium（Human）胰腺癌類器官生長(zhǎng)培養(yǎng)基 | 41434ES60/76 | 100/500 mL |
Ceturegel® Matrix for Organoid culture，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40191ES08/10 | 5/10 mL |
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品類型 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 |
基本濃度 | Ceturegel® Matrix LDEV-Free基質(zhì)膠 | 40183ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40184ES08/10 | 5/10 mL | |
低生長(zhǎng)因子 | Ceturegel® Matrix GFR，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40185ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix GFR， Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40186ES08/10 | 5/10 mL | |
高濃度 | Ceturegel® Matrix High Concentration，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40187ES08/10 | 5/10 mL |
Ceturegel® Matrix High Concentration，Phenol Red-Free，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40188ES08/10 | 5/10 mL | |
Ceturegel® Matrix High Concentration，GFR，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40189ES08/10 | 5/10 mL | |
干細(xì)胞專用 | Ceturegel® Matrix hESC-Qualified，LDEV-Free 基質(zhì)膠 | 40190ES08/10 | 5/10 mL |
鼠尾膠原 | Collagen, Type I , from rat tail 鼠尾膠原蛋白I (大鼠尾) | 40125ES10/50 | 2/10 mL |
Cebrary® Collagen, Type I , from mouse tail鼠尾膠原蛋白I型 (小鼠尾) | 40136ES10/50 | 2/10 mL |
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心