新西蘭兔復(fù)發(fā)性口腔潰瘍模型

      人類復(fù)發(fā)性口腔潰瘍(Recurrent Aphthous Ulcer, RAU)是臨床上常見的口腔黏膜疾病，其發(fā)病原因至今尚不明確。近年來大多數(shù)研究報(bào)道均認(rèn)為，其與機(jī)體免疫(尤其是自身免疫)有關(guān)，因此建立理想而合適的復(fù)發(fā)性口腔潰瘍(RAU)動(dòng)物模型意義重大。由于受到人們對(duì) RAU病因?qū)W方面認(rèn)識(shí)的限制，迄今為止臨床上尚無治療RAU的te效藥及方法。采用免疫學(xué)方法復(fù)制的本模型，其疾病發(fā)作特點(diǎn)、口腔黏膜病理損傷與臨床上人類RAU極其相似，鏡下均表現(xiàn)為非特異性炎癥。本方法建立的免疫性RAU模型，其制作機(jī)制可能是特異性蛋白作為抗原進(jìn)入機(jī)體后，產(chǎn)生了特異性抗體而誘發(fā)動(dòng)物口腔黏膜免疫反應(yīng)的結(jié)果。本模型可用作人類RAU發(fā)病機(jī)制及藥物治療方面的實(shí)驗(yàn)研究。

復(fù)發(fā)性口腔潰瘍兔子模型

動(dòng)物品系：新西蘭兔，1.5～2.0kg

實(shí)驗(yàn)分組：正常對(duì)照組、模型組、陽性藥組、受試藥組低、中、高三個(gè)劑量組

實(shí)驗(yàn)周期：6~8weeks

建模方法：首先將透析袋放入0.5mol/L的EDTA溶液中，煮0.5h后棄去溶液，更換蒸餾水再煮3次，然后貯存在含0.01％疊氮鈉的蒸餾水中，4℃保存?zhèn)溆?。用麻醉方法急性處死后，剝離其口腔黏膜組織，用勻漿器制備勻漿后，超聲波震蕩，低溫離心，保留沉淀物，取上清液再作透析以濾過小分子物質(zhì)，將大分子蛋白留于透析袋內(nèi)。透析過程同法反復(fù)5次，最后將袋內(nèi)物質(zhì)冷凍干燥，獲得粉末狀蛋白作為抗原，置-70℃低溫冰箱備用。取1.5～2.0kg體重的新西蘭兔，用預(yù)先提取的口腔黏膜蛋白12.5mg溶于0.5ml磷酸緩沖液中，再加入0.5ml的wan全弗氏佐劑呈乳化液。在家兔脊柱兩側(cè)皮內(nèi)注射上述組織乳化液1ml，共注射20點(diǎn)。每隔2周同法注射1次，共注射5次。于不同時(shí)間切取口腔黏膜作常規(guī)病理組織切片光鏡下檢查。