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熒光標記的抗體與抗原結合——艾柏森

來源:安諾倫(北京)生物科技有限公司   2024年08月23日 14:30  

熒光標記的抗體與抗原結合是一種基于抗原-抗體特異性相互作用的技術,廣泛應用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷。以下是熒光標記抗體與抗原結合的基本原理和過程:

 

特異性識別:抗體是免疫球蛋白,能夠特異性識別并結合到其相應的抗原上。這種特異性是由抗體分子的可變區(qū)(尤其是互補決定區(qū),CDR)所決定的。

 

 

熒光標記:抗體通過化學方法與熒光素(如FITCCy3、Cy5等)共價結合,形成熒光標記抗體。熒光素是一種能在特定波長光激發(fā)下發(fā)出熒光的化合物。

 

 

結合過程:熒光標記抗體與抗原的結合通常在室溫下進行,需要控制pH值、離子強度和反應時間等條件,以確保特異性結合并減少非特異性吸附。

 

 

洗滌步驟:結合反應后,通常需要用適當?shù)木彌_液洗滌樣本,以去除未結合的熒光標記抗體,從而減少背景信號。

 

 

檢測與分析:結合后的樣本可以通過熒光顯微鏡、流式細胞儀或激光共聚焦顯微鏡等設備進行觀察和分析。這些設備能夠檢測到熒光標記抗體發(fā)出的特定波長的光。

 

 

應用領域:

 

細胞生物學:用于細胞表面標記、細胞內抗原定位、細胞增殖和凋亡研究等。

組織病理學:在組織切片上進行抗原標記,用于疾病診斷和研究。

免疫分析:如ELISA、免疫熒光檢測等,用于檢測和定量抗原。

流式細胞術:用于細胞表面標志物的分析和細胞分選。

 

多重標記:通過使用不同熒光素標記的抗體,可以同時檢測多個抗原,這種技術稱為多重免疫熒光。

 

 

定量分析:熒光強度可以與抗原的量相關聯(lián),實現(xiàn)定量分析。

 

熒光標記抗體與抗原結合的技術具有高靈敏度、高特異性和直觀可視化的特點,是現(xiàn)代生物醫(yī)學研究中的工具之一。


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