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上海滬峰人(Human)乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

來(lái)源:上海滬峰生物科技有限公司   2012年04月11日 09:55  

 

試驗(yàn)原理

        HBSAG試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA.已知HBSAG濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品 加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將HBSAG和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HBSAG的濃度呈比例關(guān)系。

 

試劑盒內(nèi)容及其配制

試劑盒成份

96孔配置

48孔配置

96/48人份酶標(biāo)板

1塊板(96T

半塊板(48T

塑料膜板蓋

1

半塊

標(biāo)準(zhǔn)品:500pg/ml  

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

空白對(duì)照

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液

1瓶(8.0ml

1瓶(4.0ml

生物素標(biāo)記的抗HBSAG抗體

1瓶(8.0ml

1瓶(4.0ml

親和鏈酶素-HRP

1瓶(12ml

1瓶(5ml

洗滌緩沖液

1瓶(20ml

1瓶(10ml

底物A

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

底物B

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

終止液

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

 

自備材料

1.  蒸餾水。

2.  加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3.  振蕩器及磁力攪拌器等。

4.

 

樣品收集、處理及保存方法

 

1、 血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅

 

 

細(xì)胞迅速小心地分離。

2、  血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3  細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4  組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

 5、  保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 

操作注意事項(xiàng)

 

   試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

   實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

   不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

   使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。

   使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

   底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

   加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

   按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

 

 

 

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