Calbiotech-β2微球蛋白ELISA試劑盒用于定量測定人體血清中β-2微球蛋白（B2MG）的濃度。

艾美捷Calbiotech-β2微球蛋白ELISA試劑盒：

目錄編號   BM010T

產(chǎn)品類型 ELISA

規(guī)格  96次測試（12x8易碎條狀井）

標(biāo)準(zhǔn)范圍 0.625-10 微克/毫升

分析靈敏度

0.625 微克/毫升

樣本體積 20 微升/孔

物種 人類

儲存和穩(wěn)定性 產(chǎn)品應(yīng)儲存在2-8°C。

注意事項(xiàng) 僅供研究使用。不用于診斷程序。

β2微球蛋白ELISA試劑盒檢測原理：

B2MG ELISA檢測基于固相酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的原理。該檢測系統(tǒng)利用一種d特的單克隆抗體，針對完整的γ-2微球蛋白分子上的d特抗原決定簇。小鼠單克隆抗B2MG抗體用于固相固定（在微量孔上）。綿羊抗B2MG抗體存在于抗體-酶（辣根過氧化物酶）結(jié)合物溶液中。稀釋的測試樣品首先在37℃下與固定抗體反應(yīng)30分鐘。然后加入綿羊抗B2MG HRP偶聯(lián)物，并在37℃與固定抗原反應(yīng)30分鐘，使B2MG分子夾在固相和酶聯(lián)抗體之間。用水清洗這些孔以去除未結(jié)合的標(biāo)記抗體。加入TMB試劑溶液，在室溫下孵育20分鐘，導(dǎo)致藍(lán)色出現(xiàn)。通過添加停止溶液停止顯色，將顏色變?yōu)辄S色。B2MG的濃度與測試樣品的顏色強(qiáng)度成正比。在450nm處用分光光度法測量吸光度。

血清和血漿檢測程序

1. 使用前需將患者血清、血漿和對照血清稀釋以獲得最佳結(jié)果。

準(zhǔn)備一系列小管（如1.5毫升微量離心管），并將10 µl血清與1.0 ml樣本稀釋液混合（101倍稀釋）。標(biāo)準(zhǔn)品不需要稀釋，它們已經(jīng)預(yù)先稀釋了101倍。

2. 在架子上固定所需數(shù)量的包被孔。

3. 向相應(yīng)的孔中分配20 µl的標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋樣本和稀釋對照品。

4. 向每個(gè)孔中分配200 µl的樣本稀釋液。

5. c底混合30秒鐘。w全混合非常重要。

6. 在37°C下孵育30分鐘。

7. 通過將板內(nèi)內(nèi)容甩入廢物容器中移除孵育混合物。

8. 清除所有孔中的液體。用300 µl的1X洗滌緩沖液沖洗孔三次。在吸收性紙巾或紙巾上拍干。

9. 用力在吸收性紙巾或紙巾上拍打孔以去除所有殘留的液體滴。

10. 向每個(gè)孔中分配200 µl的酶結(jié)合物試劑。輕輕混合10秒鐘。

11. 在37°C下孵育30分鐘。

12. 按照步驟7、8和9中描述的方法移除內(nèi)容物并沖洗板。

13. 向每個(gè)孔中分配100 µl的TMB試劑。

14. 輕輕混合10秒鐘。

15. 在室溫下暗處孵育20分鐘。

16. 通過向每個(gè)孔中添加100 µl的終止溶液來停止反應(yīng)。

17. 輕輕混合10秒鐘。確保所有的藍(lán)色w全變?yōu)辄S色非常重要。

18. 在15分鐘內(nèi)使用微孔板讀取器讀取450nm處的吸光度。

血清和血漿結(jié)果計(jì)算

1. 計(jì)算每組參考標(biāo)準(zhǔn)、對照品和患者樣本的平均吸光度值（A450）。

2. 通過在圖表紙上繪制每個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)的平均吸光度與其濃度（以µg/ml為單位）的圖表，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，吸光度值在垂直或Y軸上，濃度在水平或X軸上。

3. 使用每個(gè)樣本的平均吸光度值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定相應(yīng)的B2MG濃度（以µg/ml為單位）。

尿液檢測程序

1. 尿液樣本需要用樣本稀釋液進(jìn)行10倍稀釋（即50 µl尿液 + 450 µl樣本稀釋液）。

2. 從步驟2到步驟18，按照血清/血漿測試的相同檢測程序進(jìn)行。

尿液檢測結(jié)果計(jì)算

1. 計(jì)算每組參考標(biāo)準(zhǔn)、對照品和患者樣本的平均吸光度值（A450）。

2. 通過在圖表紙上繪制每個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)的平均吸光度與其濃度（以µg/ml為單位）的圖表，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，吸光度值在垂直或Y軸上，濃度在水平或X軸上。

3. 使用每個(gè)樣本的平均吸光度值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定相應(yīng)的β2MG濃度（以µg/ml為單位）。將計(jì)算值除以10.1（由于β-2微球蛋白標(biāo)準(zhǔn)品已經(jīng)預(yù)先稀釋了101倍，因此從尿液樣本獲得的結(jié)果應(yīng)進(jìn)一步除以10.1）。例如，如果從標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出的一個(gè)尿液樣本的值為2.40 µg/ml；那么實(shí)際值將是2.40 µg/ml × 10.1 = 0.238 µg/ml。

Calbiotech-β2微球蛋白ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線示例：

典型的標(biāo)準(zhǔn)運(yùn)行結(jié)果，以450 nm處的吸光度讀數(shù)在Y軸上顯示，對應(yīng)于X軸上顯示的B2MG濃度。此標(biāo)準(zhǔn)曲線僅供示例，不應(yīng)用于計(jì)算未知數(shù)。每個(gè)用戶應(yīng)獲取自己的數(shù)據(jù)和標(biāo)準(zhǔn)曲線。

艾美捷科技是Calbiotech的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。