ALPCO活性GLP-1(7-36)酰胺化學發(fā)光ELISA試劑盒樣本處理方案
ALPCO活性GLP-1(7-36)酰胺化學發(fā)光ELISA用于定量測定人、小鼠和大鼠EDTA血漿中的活性胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)(7-26)酰胺。僅供研究使用。不用于診斷程序。
艾美捷活性GLP-1(7-36)酰胺化學發(fā)光ELISA試劑盒(ALP-80-GLP1A-CH01)檢測原理:
ALPCO STELLUX™活性GLP-1 (7-36)酰胺化學發(fā)光酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)是一種夾心型測定法。96孔微孔板涂有針對活性GLP-1 (7-36)酰胺N端的單克隆抗體。標準品、對照品和樣本被加入到含有測定緩沖液的微孔板孔中。然后,微孔板在室溫下放置在微孔板振蕩器上,以700-900轉(zhuǎn)每分鐘的速度振蕩孵育。第一次孵育完成后,孔被洗滌緩沖液清洗并吸干。然后加入檢測抗體,微孔板再次在設定為700-900轉(zhuǎn)每分鐘的微孔板振蕩器上孵育。檢測抗體孵育后,板被洗滌,每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)結合的鏈霉親和素(SA)。板在室溫下在設定為700-900轉(zhuǎn)每分鐘的板振蕩器上孵育,洗滌并吸干。加入化學發(fā)光底物,微孔板在2分鐘后使用化學發(fā)光板讀取器讀取。產(chǎn)生的光強度與樣本中活性GLP-1 (7-36)酰胺的含量成正比。
供應的材料:
Component Quantity Preparation
Active GLP-1 Microplate (96 wells) 12x8 strips Ready to use
"Standards (A-F,Zero)*
(500,120,30,10,4.0,1.5,and O pg/mL)" 1 vial each Lyophilized*
Control Levels 1,2 and 3* 1 vial each Lyophilized*
Assay Buffer 10mL Ready to use
DetectorAntibody 1 vial each Lyophilized*
Detector Antibody Buffer 14 mL Ready to use
Streptavidin-HRP 30μL 501X
Streptavidin-HRP Buffer 12 mL Ready to use
Wash Buffer Concentrate 100 mL 21X
Substrate A 6mL Ready to use
Substrate B 6 mL Ready to use
Plate Sealers 3 Ready to use
*請參閱每個試劑盒隨附的分析證書,了解批次特定信息、標準濃度、控制范圍和復溶量
所需材料:
用于分配高達1000 μL的精密移液管(帶一次性吸頭)
用于分配高達100 μL的可重復使用或多通道移液器
用于試劑準備的量筒和移液管
用于試劑準備的蒸餾水/去離子水
微孔板洗滌器或洗滌瓶
注意事項
1. 此試劑盒中包含的人血液制品已檢測HIV(人類免疫缺陷病毒)、HBV(乙型肝炎病毒)和HCV(丙型肝炎病毒)的存在。這些病毒的檢測方法不能保證病毒的W
全不存在;因此,所有試劑應被視為潛在的傳染性物質(zhì)。處理和處置應遵循所有適當?shù)膰液偷胤椒ㄒ?guī),以處理潛在的生物危害材料。
2. 所有來自動物來源的材料均為牛海綿狀腦病(BSE)陰性。然而,所有材料應被視為潛在的傳染性物質(zhì)。
3. 避免直接與皮膚接觸。
4. 本產(chǎn)品不可內(nèi)服。
5. 使用本產(chǎn)品時,避免進食、飲水或吸煙。
6. 不要用嘴吸取任何試劑。
7. 此試劑盒中的試劑是特定批次的,不得替換。
8. 不要使用超過有效期的試劑。
9. 不建議更改測試程序,可能會影響測試結果。
活性GLP-1(7-36)酰胺化學發(fā)光ELISA試劑盒樣本處理:
人、小鼠和大鼠的EDTA血漿適用于此測定。應使用BD™ P800血液收集和保存系統(tǒng)進行樣本收集,該系統(tǒng)含有DPP-IV抑制劑和其他蛋白酶抑制劑混合物(產(chǎn)品編號366420)?;蛘?,可以將全血收集到含有EDTA的冰鎮(zhèn)玻璃管中,預先根據(jù)制造商的說明加入適量的DPP-IV抑制劑(EMD Millipore Cat #DPP4)和抑蛋白酶?;旌虾髮⒐茏哟娣旁诒≈小A⒓匆?/span>1,000 xg離心管子10分鐘,或?qū)⒐茏臃旁诒喜⒃谝恍r內(nèi)離心。如果樣本將在收集后2小時內(nèi)檢測,可以將樣本保存在冰上。對于更長時間的儲存,應將樣本分裝后存放在≤ -70°C。避免多次(>3次)凍融循環(huán)。樣本解凍后,在進行測定前將樣本保持在冰上。建議在將樣本加載到板上之前,先將所有樣本在2 - 8°C下以3,000 xg離心10分鐘。含有生物素、溶血、黃疸或脂血的樣本在測定中未顯示出干擾。然而,建議避免使用明顯溶血或脂血的樣本。
典型標準曲線:
以下結果僅用于演示目的,不能代替通過測定獲得的數(shù)據(jù)。每次測定都必須運行帶有對照的標準曲線。數(shù)據(jù)分析采用1/y2加權的A5參數(shù)曲線擬合。
文獻參考:
Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.
相關產(chǎn)品
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