一、瓊脂糖凝膠
瓊脂糖是一種從紅藻中提取的天然線(xiàn)性聚合物,其基本結(jié)構(gòu)是由D-和L-半乳糖殘基通過(guò)α(1→3)和β(1→4)糖苷鍵交替連接而成的長(zhǎng)鏈。瓊脂糖在水中加熱溶解后,冷卻時(shí)能形成半固體狀的凝膠。制成的小顆粒用于凝膠過(guò)濾。適于用sephadex不能分級(jí)分離的大分子的凝膠過(guò)濾,若使用5%以下濃度的凝膠,也能夠分級(jí)分離細(xì)胞顆粒、病毒等。利用其吸附性小的特點(diǎn),有時(shí)用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內(nèi)沉降反應(yīng)的支持物。瓊脂糖凝膠具有多孔性,其孔徑大小與DNA分子的雙螺旋直徑相當(dāng),這使得它成為理想的分離介質(zhì)。此外,瓊脂糖凝膠具有親水性,且?guī)缀醪淮嬖趲щ娀鶊F(tuán),因此對(duì)生物大分子極少引起變性和吸附,是理想的惰性載體。
二、電泳原理:
1.電荷效應(yīng):
DNA分子在堿性條件下(pH>7)會(huì)電離,帶負(fù)電荷。當(dāng)DNA樣品置于電場(chǎng)中時(shí),會(huì)受到電場(chǎng)力的作用,向正極方向移動(dòng)。DNA分子的遷移速率與其所帶的電荷量成正比,而電荷量又與DNA片段的長(zhǎng)度成正比。因此,在相同電場(chǎng)條件下,較長(zhǎng)的DNA片段遷移速率較慢,而較短的DNA片段遷移速率較快。
2.分子篩效應(yīng):
分子篩效應(yīng)的原理基于分子篩的多孔結(jié)構(gòu)。分子篩晶體具有蜂窩狀的結(jié)構(gòu),晶體內(nèi)的晶穴和孔道相互溝通,并且孔徑大小均勻且固定(分子篩空腔直徑一般在3—15埃之間),只有那些直徑比較小的分子才能通過(guò)沸石孔道被分子篩吸附,而構(gòu)型龐大的分子由于不能進(jìn)入沸石孔道,則不被分子篩吸附。這種根據(jù)分子大小和形狀的不同選擇吸附的現(xiàn)象,就是分子篩效應(yīng)。
瓊脂糖凝膠由瓊脂糖分子交聯(lián)形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),其孔徑大小與瓊脂糖濃度成反比。當(dāng)DNA分子通過(guò)凝膠時(shí),會(huì)受到凝膠孔徑的阻礙。較小的DNA片段可以通過(guò)凝膠孔隙,而較大的DNA片段則會(huì)被阻擋,導(dǎo)致遷移速率降低。這種分子篩效應(yīng)使得瓊脂糖凝膠電泳能夠有效地分離不同大小的DNA片段。
三、瓊脂糖凝膠推薦
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 |
310101-1G | 1G;5G;250G;500G | |
340201-5ML | 5mL;50mL;1L | |
310201-1G | 1G;10G;100G |
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