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尼氏染色科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹

來源:世聯(lián)博研(北京)科技有限公司   2024年10月11日 13:30  
尼氏染色


尼氏染色
       尼氏染色發(fā)明于1892年,是根據(jù)它的發(fā)明人德國(guó)科學(xué)家Franz Nissl命名的。細(xì)胞的DNA和RNA帶負(fù)電荷,這是因?yàn)樗鼈兎謩e是脫氧核糖核苷酸和核糖核苷酸組成。以脫氧核糖核苷為例,它由堿基、脫氧核糖和磷酸構(gòu)成。 其中的磷酸使DNA和RNA帶負(fù)電荷、呈酸性。尼式染色正是利用了DNA、RNA酸性的特征,用堿性的染料(比如,甲酚紫、甲苯胺藍(lán))去綁定DNA和RNA,從而將細(xì)胞著色。尼氏染色的部位主要是DNA聚集的細(xì)胞核,內(nèi)質(zhì)網(wǎng),特別是粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),其上的核糖體包含的核糖體RNA占細(xì)胞RNA總量的80%以上。粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)也因?yàn)槭悄崾先旧@著的染色位點(diǎn)而被稱為尼氏體。
技術(shù)原理
       神經(jīng)元細(xì)胞體包括一個(gè)具有皺褶核膜的大細(xì)胞核、稀疏的染色質(zhì)和一個(gè)明顯的核仁。在細(xì)胞體中細(xì)胞質(zhì)是尼氏顆粒,即能夠代表粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)并在很多神經(jīng)元中產(chǎn)生特異的斑點(diǎn)狀嗜堿性表現(xiàn)的嗜堿性顆粒。尼氏顆??梢杂煤芏嗳旧珌盹@示如中性紅、亞甲基藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時(shí)間使一些染色既可以僅突出尼氏物質(zhì),也可以顯示神經(jīng)元的細(xì)胞核和神經(jīng)膠質(zhì)。各種神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)都含有尼氏體,但其形狀、數(shù)量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中,但不在于軸突和胞體的軸丘。尼氏體會(huì)因?yàn)樯頎顟B(tài)的變化而變化,尼氏體是神經(jīng)元內(nèi)合成蛋白質(zhì)合成的重要部位,當(dāng)神經(jīng)元受到刺激后,胞體內(nèi)的尼氏體會(huì)明顯減少。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇、亞甲藍(lán)、甲苯胺藍(lán)和焦油紫等染料染成紫藍(lán)色。
實(shí)驗(yàn)流程

實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示:


 
注意事項(xiàng):
       1、切片若為石蠟切片,要在二甲苯中先脫蠟。
       2、焦油紫或硫堇的染色時(shí)間也是根據(jù)染液配制時(shí)間的新舊、切片厚度和環(huán)境溫度靈活掌握。
       3、應(yīng)該在顯微鏡下觀察分色程度,使尼氏小體呈深色而背底基本無色為最佳。如分色不夠,可以退回酒精再次分色。如分色過度,也可退回再染。
       4、尼氏染色應(yīng)充分脫水,否則容易褪色。
       5、HE染色方法雖然也能觀察到胞質(zhì)中嗜堿性顆粒,但結(jié)構(gòu)不甚清晰,神經(jīng)元的軸突、樹突難以辨認(rèn)。在尼氏染色中尼氏體清晰可辨,而且很容易區(qū)分軸突和樹突。尼氏染色中尼氏體受染后呈塊狀(形如虎斑)或顆粒狀,核周圍尼氏體顆粒較大,近邊緣處較小而細(xì)長(zhǎng),如在生理情況下,尼氏體大而數(shù)量多,反映神經(jīng)細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的功能較強(qiáng),在神經(jīng)元受損時(shí),尼氏體的數(shù)量可減少甚至消失。


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