穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系篩選

一、實(shí)驗(yàn)介紹

　　將我們所要的目的基因整合到宿主細(xì)胞上，隨著細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖，目的基因可以穩(wěn)定的表達(dá)，在通過(guò)抗生素的不斷加壓篩選，最終得到構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系的過(guò)程。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/span>

　　獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。

三、實(shí)驗(yàn)步驟

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示

五、送樣運(yùn)輸要求：

1 凍存細(xì)胞

凍存管寄送前，使用封口膜把凍存管口封嚴(yán)密，凍存管單獨(dú)用自封袋存放。干冰運(yùn)輸。運(yùn)輸時(shí)間在2天以?xún)?nèi)干冰用量在10kg，在2-4天，干冰用量在20kg。

2 活細(xì)胞

1. 使用T25瓶，瓶蓋無(wú)孔。

2. 生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞，細(xì)胞密度在30%-40%為宜，寄送前，移去瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)基，添加新培養(yǎng)基至瓶頸部，保留微量空氣，擰緊瓶蓋，并用封口膜密封，瓶身用75%表面消毒，把瓶用無(wú)菌袋或自封袋包裝，然后放置在適當(dāng)?shù)暮袃?nèi)，盒周?chē)妹藁ǖ茸龇勒鸱缐禾幚?。?dāng)溫度低于10度是要加保溫措施，如暖寶寶等。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)條件備注完整，如培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度，FBS用量等。

4. 備注：運(yùn)送時(shí)間原則在4天以?xún)?nèi)，如細(xì)胞生長(zhǎng)速度快，則加入的培養(yǎng)基血清可以減半，細(xì)胞密度在20%-30%。