細(xì)胞劃痕實驗
一、實驗介紹:
當(dāng)細(xì)胞長到融合成單層狀態(tài)時,在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個空白區(qū)域,即為“劃痕”,劃痕邊緣的細(xì)胞會逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕”愈合。通過對不同時期劃痕區(qū)域細(xì)胞狀態(tài)的觀察,對細(xì)胞的遷移能力進(jìn)行判斷。細(xì)胞遷移是指細(xì)胞在接收到遷移信號或感受到某些物質(zhì)的梯度后而產(chǎn)生的移動。免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、癌癥轉(zhuǎn)移等過程中都涉及細(xì)胞遷移。
二、實驗?zāi)康模?/span>
細(xì)胞劃痕實驗是研究細(xì)胞遷移能力的體外實驗。
三、實驗步驟:
四、結(jié)果展示:
五、送樣運輸要求:
1 凍存細(xì)胞
凍存管寄送前,使用封口膜把凍存管口封嚴(yán)密,凍存管單獨用自封袋存放。干冰運輸。運輸時間在2天以內(nèi)干冰用量在10kg,在2-4天,干冰用量在20kg。
2 活細(xì)胞
使用T25瓶,瓶蓋無孔。
生長狀態(tài)良好的細(xì)胞,細(xì)胞密度在30%-40%為宜,寄送前,移去瓶內(nèi)舊培養(yǎng)基,添加新培養(yǎng)基至瓶頸部,保留微量空氣,擰緊瓶蓋,并用封口膜密封,瓶身用75%表面消毒,把瓶用無菌袋或自封袋包裝,然后放置在適當(dāng)?shù)暮袃?nèi),盒周圍用棉花等做防震防壓處理。當(dāng)溫度低于10度是要加保溫措施,如暖寶寶等。
細(xì)胞培養(yǎng)條件備注完整,如培養(yǎng)基,培養(yǎng)溫度,FBS用量等。
備注:運送時間原則在4天以內(nèi),如細(xì)胞生長速度快,則加入的培養(yǎng)基血清可以減半,細(xì)胞密度在20%-30%。
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