防御素是陽(yáng)離子抗菌肽，由多種細(xì)胞類型（如白細(xì)胞、上皮細(xì)胞和樹突細(xì)胞）產(chǎn)生，在哺乳動(dòng)物的先天免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。人類已描述兩類防御素：α-防御素和β-防御素，其分子量范圍為3.5至4.5 kDa，由三對(duì)分子內(nèi)二硫鍵穩(wěn)定，不同的成熟肽中二硫鍵的排列順序也各不相同。目前，已有六種α-防御素（也稱為人類中性粒細(xì)胞肽，HNP1-6）和六種β-防御素（HBD1-6）被研究。這些防御素均顯示出對(duì)細(xì)菌、真菌和包膜病毒的廣譜體外抗菌活性，這種活性在體內(nèi)保護(hù)宿主免受病原體侵害方面非常重要。

研究者還探討了防御素誘導(dǎo)釋放與炎癥和適應(yīng)性免疫相關(guān)的細(xì)胞因子和趨化因子的能力，從而在先天免疫與適應(yīng)性免疫之間提供了一種調(diào)節(jié)作用。相關(guān)研究已經(jīng)測(cè)量了血清、唾液、乳汁、羊水以及肺部和宮頸陰道沖洗液中的防御素，以及血液、肺、皮膚、腸道、肌肉、軟骨和腎臟等組織細(xì)胞培養(yǎng)基中的防御素。

Alpha Diagnostics開發(fā)了一種免疫測(cè)定法，用于檢測(cè)和定量人類樣本中的β-防御素2，以用于先天免疫研究。該試劑盒適用于多種樣本類型，并經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)木€性和回收驗(yàn)證。

Alpha Diagnostic International人β防御素2（hBD-2）ELISA試劑盒是一種夾心ELISA試劑盒用于定量BD-2人細(xì)胞培養(yǎng)物和適當(dāng)合格的來(lái)自血清、唾液或其他組織液的樣本。僅供研究使用（RUO）；不用于治療或診斷使用。

艾美捷Alpha Diagnostic International 人β-防御素-2（BD-2）ELISA試劑盒，定量，96次檢測(cè)（ADI-100-250-BD2）檢測(cè)原理：

人β-防御素2 ELISA試劑盒是基于樣本中人類β-防御素2與兩種抗體的結(jié)合。一個(gè)抗體固定在微孔板上，另一個(gè)抗體則與生物素偶聯(lián)，隨后與鏈霉親和素過(guò)氧化物酶（HRP）偶聯(lián)物結(jié)合。在洗滌步驟后，添加顯色底物，通過(guò)HRP對(duì)TMB底物的酶促反應(yīng)生成顏色，這種顏色的深淺與樣本中BD-2的含量成正比。然后添加終止溶液以停止反應(yīng)，并使用ELISA微孔板讀數(shù)儀在450nm處測(cè)量吸光度。樣本中BD-2的濃度是通過(guò)Z定濃度的純化重組人BD-2標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出的。

結(jié)果計(jì)算：

結(jié)果可以使用任何免疫檢測(cè)軟件包進(jìn)行計(jì)算。推薦使用四參數(shù)曲線擬合。如果沒(méi)有可用的軟件，可以按以下步驟確定BD-2的濃度：

1、計(jì)算重復(fù)樣品的平均光密度（OD）。

2、在圖紙上將標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD（y軸）與BD-2的濃度（pg/ml，x軸）繪制成圖。通過(guò)這些點(diǎn)繪制最佳擬合曲線以構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。逐點(diǎn)構(gòu)建是最常見和可靠的方法。

3、可以通過(guò)從標(biāo)準(zhǔn)曲線插值法確定未知樣品和對(duì)照的BD-2濃度。

4、將獲得的樣品值乘以稀釋因子。

5、產(chǎn)生的信號(hào)高于200 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)的樣品應(yīng)進(jìn)一步稀釋并重新檢測(cè)。

典型結(jié)果：

Alpha Diagnostic International（ADI）致力于開發(fā)、制造和供應(yīng)新型診斷和質(zhì)量控制試劑及檢測(cè)試劑盒，用于人類和動(dòng)物的基礎(chǔ)生物學(xué)和疾病研究。艾美捷科技是Alpha Diagnostic International 的特約合作代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。