大腸桿菌 XL1-Blue 菌株。

質(zhì)粒 DNA。

電轉(zhuǎn)化儀及配套的電擊杯。

培養(yǎng)基等常規(guī)實驗試劑。

細胞培養(yǎng)：將大腸桿菌 XL1-Blue 菌株接種于適宜的培養(yǎng)基中，在特定條件下培養(yǎng)至不同的生長階段。

制備感受態(tài)細胞：收集處于特定生長階段的細胞，通過適當(dāng)?shù)奶幚矸椒ㄖ苽涓惺軕B(tài)細胞。

電轉(zhuǎn)化操作：將不同量的質(zhì)粒 DNA 與感受態(tài)細胞混合，放入電擊杯中。設(shè)置不同的電轉(zhuǎn)化參數(shù)，如電場強度、脈沖時間等，進行電轉(zhuǎn)化操作。

轉(zhuǎn)化后處理：將電擊后的細胞轉(zhuǎn)移至復(fù)蘇培養(yǎng)基中，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，使細胞恢復(fù)并表達外源基因。

轉(zhuǎn)化效率測定：通過平板計數(shù)法或其他合適的方法測定轉(zhuǎn)化后的細胞數(shù)量，計算轉(zhuǎn)化效率。

當(dāng)電場強度較低時，細胞膜上形成的微孔較少且較小，外源 DNA 難以進入細胞，導(dǎo)致轉(zhuǎn)化效率較低。

隨著電場強度的增加，微孔數(shù)量和大小增加，轉(zhuǎn)化效率逐漸提高。但當(dāng)電場強度過高時，會對細胞造成嚴(yán)重的損傷，導(dǎo)致細胞死亡，從而降低轉(zhuǎn)化效率。

較短的脈沖時間可能不足以使外源 DNA 充分進入細胞，而較長的脈沖時間則可能對細胞造成過度損傷。

存在一個適宜的脈沖時間范圍，在此范圍內(nèi)轉(zhuǎn)化效率較高。

處于對數(shù)生長期的細胞通常具有較高的轉(zhuǎn)化效率，因為此時細胞代謝活躍，細胞膜的通透性較好。

而處于靜止期或老化期的細胞轉(zhuǎn)化效率較低。

質(zhì)粒 DNA 的質(zhì)量和濃度、電擊杯的清潔度等因素也可能對轉(zhuǎn)化效率產(chǎn)生影響。