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原代細胞培養(yǎng)的主要注意事項

來源:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司   2024年10月22日 11:17  
原代小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)體系是一個為體外生長的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動物的小梁網(wǎng)細胞設(shè)計的理想的完培方案。本體系是一個基于碳酸氫鹽的緩沖體系,可以在孵育的5%的CO2的氣體環(huán)境下維持一個圍繞pH7.2的酸堿緩沖體系。本體系是一個無菌的液體混合系統(tǒng),其中包含必須和非必須氨基酸、維生素、激素、生長因子、微量元素和一些其他的有機和無機化合物以及胎牛血清(10%)。本培養(yǎng)體系是基于固定配方配制的液態(tài)培養(yǎng)體系,可以為體外培養(yǎng)的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動物的小梁網(wǎng)細胞提供一個確定適宜的平衡營養(yǎng)環(huán)境,并且可以選擇性的促進小梁網(wǎng)細胞的擴增。
注意事項:
1、組織塊培養(yǎng)法:
(1)剛接種后,組織塊粘附不牢固,觀察和轉(zhuǎn)移過程中動作要輕,以防引起液體振蕩,使組織塊漂起
(2)培養(yǎng)初期,要注意觀察有無細菌、霉菌污染
(3)原代培養(yǎng)要及時觀察,記錄
(4)過3-5天,需要換液以除去漂浮組織塊和殘留的血細胞,保證原代細胞正常生長
2、消化培養(yǎng)法:某些特殊類型細胞如內(nèi)皮細胞需用特殊的消化手段和步驟進行
3、器官培養(yǎng)和組織塊培養(yǎng)類似
4、懸浮細胞培養(yǎng)法:注意調(diào)整細胞濃度

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