
背 景

人血清白蛋白(HSA)作為人血漿中含量的蛋白,是激素、脂類等物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)載體,其主要生理功能是調(diào)節(jié)血漿pH值和維持血漿滲透壓。人血清白蛋白是一種由585個(gè)氨基酸組成的單鏈蛋白質(zhì),分子量為66.5kDa。
白蛋白可提供對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)很重要的氮和必需氨基酸,并有助于維持細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中的滲透壓平衡。此外,白蛋白還可作為細(xì)胞附著的底物,有助于穩(wěn)定 pH 值,甚至保護(hù)細(xì)胞免受壓力和損傷。白蛋白通常以不同濃度添加到細(xì)胞培養(yǎng)基中—具體取決于細(xì)胞類型和培養(yǎng)應(yīng)用。并可作為激素、維生素和其他生長(zhǎng)因子的載體蛋白。此外,HSA可用作疫苗中的穩(wěn)定劑和/或佐劑。
圖1.人血清白蛋白結(jié)構(gòu)圖[1]

血清白蛋白來(lái)源

重組人血清白蛋白,與胎牛血清(FBS)、血漿來(lái)源白蛋白(pHSA)和牛血清白蛋白(BSA)相比,重組人血清白蛋白具有更高的純度,更好的批次穩(wěn)定性。高質(zhì)量的重組人白蛋白不含其他雜質(zhì)和非天然修飾,無(wú)任何血源性病毒感染風(fēng)險(xiǎn),使其成為細(xì)胞和組織培養(yǎng)領(lǐng)域的選擇。
表1.重組人血清白蛋白和天然人血清白蛋白理化性質(zhì)比較

白蛋白是許多無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的重要組分,例如雜交瘤細(xì)胞和中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞的培養(yǎng)系統(tǒng)。
白蛋白可摻入細(xì)胞支架,為細(xì)胞提供必需營(yíng)養(yǎng)成分和生長(zhǎng)因子來(lái)源,促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖。人血清白蛋白用作細(xì)胞培養(yǎng)基補(bǔ)充劑,維持生產(chǎn)單克隆抗體、重組蛋白和其他生物制品所用的細(xì)胞生長(zhǎng)和健康。白蛋白還可使細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境更穩(wěn)定和可控,降低動(dòng)物源血清相關(guān)的批次間差異和污染風(fēng)險(xiǎn)。
哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
白蛋白與大量生物活性物質(zhì)結(jié)合使其成為關(guān)鍵的轉(zhuǎn)運(yùn)分子。白蛋白還能清除對(duì)細(xì)胞存活有害的活性氧。這些特性使白蛋白成為促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和在體外培養(yǎng)環(huán)境下維持各種真核細(xì)胞的選擇。重組人血白蛋白非常適合各種不同的干細(xì)胞、原代細(xì)胞和生產(chǎn)細(xì)胞類型,包括免疫細(xì)胞、VERO、間充質(zhì)干細(xì)胞、HEK293、二倍體細(xì)胞、CHO 和其他細(xì)胞類型。
疫苗生產(chǎn)及制備
HSA 是穩(wěn)定疫苗的重要成分,為多種疫苗類型提供多種益處,包括減毒活病毒、滅活或滅活病毒、病毒樣顆粒和亞單位疫苗。HSA 的顯著特性之一在于其能夠涂覆疏水性和親水性表面,從而阻止疫苗在從生產(chǎn)、配制到儲(chǔ)存的整個(gè)生命周期中發(fā)生不良的非特異性吸附。 通過(guò)HSA的結(jié)合能力,能夠進(jìn)行離子和疏水相互作用,HSA 可以保護(hù)暴露的疫苗表面,避免不必要的聚集和顆粒形成,否則可能會(huì)損害疫苗功效。
體外/體內(nèi)疾病診斷
HSA 是多種疾病的生物標(biāo)志物,包括癌癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、缺血、肝病、肥胖和糖尿病等疾病。
人血清白蛋白在干細(xì)胞治療中的應(yīng)用
白蛋白作為細(xì)胞培養(yǎng)基中的成分已長(zhǎng)期存在。 其促進(jìn)多種細(xì)胞類型生長(zhǎng)的能力得到充分證明,包括間充質(zhì)干細(xì)胞 (MSC)、胚胎干細(xì)胞 (ESC)、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 (iPSC) 和免疫細(xì)胞。 在細(xì)胞培養(yǎng)中,白蛋白不僅僅是一種營(yíng)養(yǎng)來(lái)源。 它扮演著多功能儲(chǔ)存庫(kù)的角色,保護(hù)必需金屬和其他分子實(shí)體,從而為細(xì)胞持續(xù)生長(zhǎng)和活力創(chuàng)造最佳環(huán)境。
除了對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用之外,白蛋白還可用作干細(xì)胞冷凍保存。 白蛋白的表面涂層能力確保細(xì)胞在冷凍過(guò)程中的安全。 此外,白蛋白的緩沖能力可保持細(xì)胞完整性所必需的 pH 平衡,同時(shí)其穩(wěn)定能力可使細(xì)胞保持懸浮狀態(tài),從而延長(zhǎng)其在冷凍保存期間的活力。
此外,白蛋白還可以作為藥物載體,延長(zhǎng)藥物體內(nèi)循環(huán)時(shí)間、增強(qiáng)藥效。

白蛋白在培養(yǎng)基中的作用機(jī)制

結(jié)合脂肪酸
白蛋白是血漿中 99% 的非酯化脂肪酸 (FA) 的載體。白蛋白具有 7 個(gè)高親和力和 20 多個(gè)低親和力 FA 結(jié)合位點(diǎn)。亞油酸、亞麻酸和油酸等脂肪酸均不溶于水溶液,所以必須通過(guò)載體分子才能傳遞至細(xì)胞。循環(huán)白蛋白通??蛇\(yùn)載1個(gè)或2個(gè)游離脂肪酸。脂肪酸的結(jié)合還有助于穩(wěn)定白蛋白。作為細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,白蛋白的活性部分取決于其結(jié)合和傳遞給細(xì)胞的特異性脂肪酸。
結(jié)合金屬離子
金屬離子是細(xì)胞培養(yǎng)所需的成分。HSA 是關(guān)鍵金屬離子 Cu 2+和 Zn 2+的關(guān)鍵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 。此外,銅原子可發(fā)生單價(jià)氧化還原反應(yīng)并催化自由基生成,從而使銅具有細(xì)胞毒性。在體內(nèi),細(xì)胞外銅離子與白蛋白結(jié)合,削弱了銅的潛在毒性。每個(gè)白蛋白分子都具有一個(gè)高親和性銅結(jié)合位點(diǎn),銅與該位點(diǎn)結(jié)合后,將不會(huì)參與自由基相關(guān)的氧化還原反應(yīng)。白蛋白還可結(jié)合其他二價(jià)陽(yáng)離子,如Ca、Mg、Mn、Cd、Co和Ni。
HSA的抗氧化特性
HSA 的抗氧化活性主要?dú)w因于四個(gè)主要金屬結(jié)合位點(diǎn)的氧化還原特性。游離的Cu 2+、Fe 2+和其他金屬離子與氧反應(yīng)生成ROS ,它們還可以與H2O2相互作用產(chǎn)生有害的羥基自由基。另一方面,白蛋白與金屬離子的結(jié)合限制了這些離子參與ROS生成的能力。
在生物反應(yīng)器中進(jìn)行的工業(yè)規(guī)模真核細(xì)胞培養(yǎng)物含有溶解氧和游離金屬,如鐵、銅、鈷和鎳,產(chǎn)生的 ROS 會(huì)降解細(xì)胞膜 。添加 BSA 或 HSA 可降低 ROS 壓力,從而實(shí)現(xiàn)健康的細(xì)胞培養(yǎng)。另一方面,白蛋白與這些金屬,特別是銅、鋅、釩和硒的結(jié)合,促進(jìn)細(xì)胞對(duì)這些金屬的吸收,刺激培養(yǎng)物生長(zhǎng)并顯著提高真核細(xì)胞中重組蛋白的產(chǎn)量。
結(jié)合吡哆醛和
氨基酸是細(xì)胞培養(yǎng)基的關(guān)鍵成分。吡哆醛及其衍生物5'磷酸吡哆醛(PLP)與,可與氨基酸發(fā)生非酶促反應(yīng)并形成希夫(Schiff)堿。這些希夫堿非常不穩(wěn)定,當(dāng)與金屬離子接觸時(shí),它們會(huì)導(dǎo)致氨基酸降解,細(xì)胞生長(zhǎng)抑制。游離的吡哆醛部分通過(guò)與白蛋白結(jié)合而被隔離,從而防止吡哆醛與氨基酸體外反應(yīng)并破壞氨基酸。
結(jié)合核黃素
核黃素是另一個(gè)可以與游離氨基酸發(fā)生反應(yīng)并降解它們的因子。在水溶液中,核黃素可以與色氨酸結(jié)合形成復(fù)合物。在光照條件下,該復(fù)合物分解為毒性產(chǎn)物。白蛋白可與核黃素及其磷酸鹽(黃素單磷酸鹽)結(jié)合并防止它們發(fā)生降解。白蛋白具有單個(gè)色氨酸結(jié)合位點(diǎn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)

翌圣生物提供多種類型重組血清白蛋白,包括人、小鼠、大鼠、猴等種屬。
純度高:>99%,經(jīng)SDS-PAGE和HPLC檢測(cè);
無(wú)動(dòng)物源:不含有動(dòng)物源成分,無(wú)任何血源性病毒感染風(fēng)險(xiǎn);
均一穩(wěn)定:高批次均一性和高穩(wěn)定性;
應(yīng)用性廣:可適用于不同類型細(xì)胞的培養(yǎng)。

訂購(gòu)信息

產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
Recombinant Human Serum Albumin(rHSA) 重組人血清白蛋白(植物表達(dá),細(xì)胞培養(yǎng)級(jí),凍干粉) | 20901ES | 1g/5g/10g |
Recombinant Human Serum Albumin Protein (HSA) 重組人血清白蛋白(液體,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)) | 92618ES | 1g/5g/10g |
Recombinant Mouse Serum Albumin Protein,His Tag 重組小鼠血清白蛋白 | 92628ES | 25μg/100ug/500μg |
Recombinant Cynomolgus Serum Albumin Protein,His Tag 重組食蟹猴血清白蛋白 | 92627ES | 25μg/100ug/500μg |
Recombinant Rat Serum Albumin Protein,His Tag 重組大鼠血清白蛋白 | 92625ES | 25μg/100ug/500μg |
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