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一文教你了解和選擇蛋白酶K

來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2024年12月24日 09:13  

蛋白酶K的概念和作用


Proteinase K(蛋白酶 K)是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶,其相對分子量約為 29.3 kDa,可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。Proteinase K 應用廣泛,可用于制備脈沖電泳的染色體 DNA,蛋白質(zhì)印跡以及去除 DNA 和 RNA制備中的核酸酶等實驗,而變性劑如 SDS(1 %)可提高其活性。

 

蛋白酶K的特點

  • 源于基因重組酵母菌株;

  • 不含 RNase 和 DNase;

  • 在尿素和 SDS 中活性穩(wěn)定存在;

  • 在較廣的 pH 范圍內(nèi)(pH 4.0 – 12.0)均有活性,最佳 pH 范圍為 pH 7.5 - 9.0;

 

蛋白酶K的應用

01

在新冠等生物檢測中的應用

對于新冠病毒,核酸擴增試驗時的處理、抽提、擴增為高風險,因此擴增前需要對標本先行滅活病毒,蛋白酶K(Proteinase K)是病毒采樣液的重要組分,可裂解病毒釋放核酸,消除核酸分解酶(RNase)以防止病毒的RNA降解。并且可以滅活病毒,讓病毒的蛋白變性,失去活性而“死掉”,不再有傳染性,提高運輸和檢測階段的安全性。

02

在核酸提取過程中的應用

蛋白酶K在DNA和RNA提取過程中扮演著至關重要的角色。它能夠降解與核酸結(jié)合的蛋白質(zhì),使DNA和RNA從樣品中釋放出來,游離到提取液中,便于后續(xù)的純化和分析。這一特性使得蛋白酶K成為分子生物學實驗中的工具。特別是在新冠病毒核酸檢測中,蛋白酶K是病毒采樣液的重要組分之一,它能夠裂解病毒的外殼蛋白并使其失活,從而確保在運輸和檢測階段的安全性。同時,蛋白酶K還能降解RNA酶,防止病毒RNA的降解,提高核酸檢測的準確性。

 

03

在原位雜交中的應用

蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前標本的處理,具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用,以利于檢測探針的穿透,提高檢測的敏感性。

 

04

病毒與微生物的消殺

蛋白酶K的病毒消殺能力也是其備受關注的原因之一。病毒外層結(jié)構(gòu)一般以衣殼蛋白為主,蛋白酶K能夠?qū)Σ《颈砻娴牡鞍走M行破壞,進而造成病毒因結(jié)構(gòu)不完整而失去攻擊宿主細胞的能力。研究表明,在適當?shù)臐舛群吞幚頃r間下,蛋白酶K對純水和生活污水中的病毒具有很高的滅活率。這種高效且環(huán)保的消毒方法,為水處理和病毒防控提供了新的思路。

05

在工業(yè)領域的應用

蛋白酶K在工業(yè)領域的應用同樣廣泛。在造紙、工業(yè)制革、飼料生產(chǎn)以及食品加工等行業(yè)中,蛋白酶K可以作為替代其他作用范圍較窄的蛋白酶,提高生產(chǎn)效率。例如,在皮革工業(yè)中,蛋白酶K被用于脫毛和軟化過程,既節(jié)省了時間,又改善了勞動衛(wèi)生條件。在肉類加工中,蛋白酶K能夠分解肉中的肌纖維和結(jié)締組織,使肉質(zhì)變嫩,增強口感。此外,蛋白酶K還可以用于酒類澄清、氨基酸制備以及飼料中蛋白質(zhì)的降解等過程。

 

產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

產(chǎn)品特點

Proteinase K蛋白酶K

10401ES

100mg/1g/5 g/100g

粉末狀,可以根據(jù)實驗要求,配制成目標濃度

Proteinase K Solution蛋白酶K溶液(20 mg/mL)

10412ES

1mL/10mL/25mL/500mL

液體,免配制,使用起來更方便

Proteinase K Solution蛋白酶K溶液(低殘留)

10410ES

1 mL/5 mL/100 mL /1000 mL

極低的背景菌殘留,更適合病原微生物核酸提取

 



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