Proteinase K（蛋白酶 K）是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶，其相對(duì)分子量約為 29.3 kDa，可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。Proteinase K 應(yīng)用廣泛，可用于制備脈沖電泳的染色體 DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除 DNA 和 RNA制備中的核酸酶等實(shí)驗(yàn)，而變性劑如 SDS（1 %）可提高其活性。

蛋白酶K的應(yīng)用

對(duì)于新冠病毒，核酸擴(kuò)增試驗(yàn)時(shí)的處理、抽提、擴(kuò)增為高風(fēng)險(xiǎn)，因此擴(kuò)增前需要對(duì)標(biāo)本先行滅活病毒，蛋白酶K(Proteinase K)是病毒采樣液的重要組分，可裂解病毒釋放核酸，消除核酸分解酶(RNase)以防止病毒的RNA降解。并且可以滅活病毒，讓病毒的蛋白變性，失去活性而“死掉”，不再有傳染性，提高運(yùn)輸和檢測(cè)階段的安全性。

蛋白酶K在DNA和RNA提取過(guò)程中扮演著至關(guān)重要的角色。它能夠降解與核酸結(jié)合的蛋白質(zhì)，使DNA和RNA從樣品中釋放出來(lái)，游離到提取液中，便于后續(xù)的純化和分析。這一特性使得蛋白酶K成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的工具。特別是在新冠病毒核酸檢測(cè)中，蛋白酶K是病毒采樣液的重要組分之一，它能夠裂解病毒的外殼蛋白并使其失活，從而確保在運(yùn)輸和檢測(cè)階段的安全性。同時(shí)，蛋白酶K還能降解RNA酶，防止病毒RNA的降解，提高核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前標(biāo)本的處理，具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以利于檢測(cè)探針的穿透，提高檢測(cè)的敏感性。

蛋白酶K的病毒消殺能力也是其備受關(guān)注的原因之一。病毒外層結(jié)構(gòu)一般以衣殼蛋白為主，蛋白酶K能夠?qū)Σ《颈砻娴牡鞍走M(jìn)行破壞，進(jìn)而造成病毒因結(jié)構(gòu)不完整而失去攻擊宿主細(xì)胞的能力。研究表明，在適當(dāng)?shù)臐舛群吞幚頃r(shí)間下，蛋白酶K對(duì)純水和生活污水中的病毒具有很高的滅活率。這種高效且環(huán)保的消毒方法，為水處理和病毒防控提供了新的思路。

蛋白酶K在工業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用同樣廣泛。在造紙、工業(yè)制革、飼料生產(chǎn)以及食品加工等行業(yè)中，蛋白酶K可以作為替代其他作用范圍較窄的蛋白酶，提高生產(chǎn)效率。例如，在皮革工業(yè)中，蛋白酶K被用于脫毛和軟化過(guò)程，既節(jié)省了時(shí)間，又改善了勞動(dòng)衛(wèi)生條件。在肉類(lèi)加工中，蛋白酶K能夠分解肉中的肌纖維和結(jié)締組織，使肉質(zhì)變嫩，增強(qiáng)口感。此外，蛋白酶K還可以用于酒類(lèi)澄清、氨基酸制備以及飼料中蛋白質(zhì)的降解等過(guò)程。