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ELISA標(biāo)本收集

來源:上海索寶生物科技有限公司   2012年06月04日 12:34  

 ELISA標(biāo)本收集

在收集標(biāo)本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是
否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測,對收集后當(dāng)天就進(jìn)行
檢測的標(biāo)本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)
本,請造模取材后,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下
保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗
質(zhì)量,所以避免反復(fù)凍融。代測標(biāo)本的客戶取材前須向我司銷售人
員索要說明書,具體操作注意事項請與我司技術(shù)人員溝通。
ELISA標(biāo)本一般包括血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織標(biāo)
本、胸腹水、腦脊液等。
血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)
/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合
10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上
清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集
上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參
照此實行。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時, 用無菌管收集。離心2 0 分鐘左右
(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用
PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。
通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左
右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形
成,應(yīng)再次離心。
組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速
冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的
PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左
右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其
余冷凍備用。
腦脊液標(biāo)本:
腦脊液標(biāo)本采集后立即送檢,放置過久將影響檢驗結(jié)果:如細(xì)胞變
性,破壞,導(dǎo)致計數(shù)和分類不準(zhǔn);有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解
含量減少;細(xì)菌發(fā)生自溶影響細(xì)菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分
裝三個無菌管,*管作細(xì)菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢
查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒。因標(biāo)
本采集較難,全部送檢和檢測過程應(yīng)注意安全。
胸腹水標(biāo)本:
與腦脊液標(biāo)本一樣,采集后的標(biāo)本注意安全,及時送檢。一般也分
裝三管,一管作常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢查,一管生化檢查,一管細(xì)菌培養(yǎng),
順序以與腦脊液相同為宜

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