ProteanFect和Lipo系列轉染試劑的區(qū)別,怎么選擇?
ProteanFect和陽離子脂質體轉染(Lipo)是兩種常用的轉染技術,它們在實驗原理、操作步驟和適用范圍上存在一些區(qū)別。
實驗原理
Lipo轉染:
- 利用帶正電的陽離子脂質體與帶負電的DNA通過靜電作用力結合形成DNA-脂質體復合物。
- 復合物被細胞膜表面吸附后通過內吞作用進入細胞,在內涵體內釋放,可能通過膜融合或內吞體破裂等方式將DNA釋放到細胞質中。
- 最終DNA通過細胞質轉運到細胞核,實現(xiàn)外源基因的表達。
ProteanFect轉染:
- 核酸藥物與內源蛋白自動組裝形成ProteanFect-核酸復合物。
- 細胞主動攝入ProteanFect-核酸復合物進入細胞,核酸分子釋放,內源蛋白被內在降解途徑降解。
- 外源基因表達。
操作步驟
Lipo轉染:
- 將核酸與Lipofection Reagent混合形成復合物。
- 將復合物加入細胞培養(yǎng)體系中進行轉染。
- 經過12-72小時后進行基因表達檢測。
ProteanFect轉染:
- 制備ProteanFect轉染體系。
- 將ProteanFect轉染體系加入待轉染細胞。
- 根據(jù)細胞類型孵育15-120分鐘,最快可在結束反應1小時后觀察到目的基因的表達。
適用范圍
Lipo轉染:
- 不適用于難轉細胞系和原代細胞,因為這些細胞可能對Lipo轉染產生較大毒性,轉染效率低,且對培養(yǎng)條件有特殊要求。
ProteanFect轉染:
- 適用于多種細胞系,包括難轉細胞系和原代細胞,因為ProteanFect具有高轉染效率和低細胞毒性,且操作簡便。
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