細胞復蘇成敗和凍存及復蘇操作密切相關(guān)。上個星期和大家分享了細胞凍存方面容易出錯的細節(jié),詳見《細胞復蘇失敗原因分析——凍存篇》。本篇主要從復蘇角度分析,排查復蘇過程中容易出現(xiàn)的問題。
復蘇步驟
同樣,我們先復習一下復蘇步驟:
1. 提前將水浴鍋預熱至37℃,培養(yǎng)基復溫,離心機設(shè)置好轉(zhuǎn)速;
2. 準備一個15ml離心管并加入適量培養(yǎng)基。
3. 取出凍存管,浸入水浴鍋迅速搖晃使細胞在2min內(nèi)充分融化;
4. 將細胞懸液緩慢滴入提前加了培養(yǎng)基的離心管,1000rpm 3min離心;
5. 棄上清,重懸細胞并接種至培養(yǎng)器皿中,放入培養(yǎng)箱。

復蘇常見的錯誤操作

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