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Kromasil液相色譜柱154|川芎配方顆粒特征圖譜的測定 高效液相色譜法

來源:上海鯤霆生物科技有限公司   2025年02月19日 16:45  

案例說明

川芎配方顆粒試樣經(jīng)70%甲醇超聲提取后,采用梯度洗脫,用紫外檢測器檢測。川芎配方顆粒應呈現(xiàn)10個特征峰。

 

分析條件

色譜柱:Kromasil 100-5-C18,4.6*250mm (訂貨號:M05CLA25

流動相:(A)乙腈        B0.1%磷酸溶液

按下表進行梯度洗脫:

時間/min

流動相A%

流動相B%

0

8

92

5

8

92

25

20

80

45

40

60

50

80

20

65

80

20

 

流速:1.0mL/min

進樣量:10μL

柱溫:25

波長:300nm

 

 

分析圖譜

依據(jù)色譜條件(4.2),分別將對照品參照物溶液與供試品溶液注入液相色譜儀進行測定,參照物溶液的色譜圖如圖 1所示,色譜圖積分結(jié)果見表1。

KTYY-LC-154-川芎配方顆粒特征圖譜的測定 高效液相色譜法-圖1對照品.png


 

1對照品參照物溶液色譜圖積分結(jié)果

目標物

保留時間

峰面積

峰高

理論塔板數(shù)

分離度

對稱/拖尾因子

阿魏酸

30.575

1872.393

162.713

166874

-

1.04

由表1中數(shù)據(jù)可知,阿魏酸的理論塔板數(shù)為166874,滿足《川芎配方顆粒》中規(guī)定的阿魏酸峰的理論塔板數(shù)不低于4000的要求。

供試品溶液的色譜圖如圖2所示,色譜圖積分結(jié)果見表2,特征峰相對保留時間結(jié)果見表3。

 

 

 

 

KTYY-LC-154-川芎配方顆粒特征圖譜的測定 高效液相色譜法-圖2供試品.png

  

2供試品溶液色譜圖積分結(jié)果

目標物

保留時間

峰面積

峰高

理論塔板數(shù)

分離度

對稱/拖尾因子

1:綠原酸

17.717

363.212

36.420

74022

-

1.07

2:隱綠原酸

19.242

188.500

19.851

95643

5.99

1.01

3:咖啡酸

21.383

234.216

21.459

88350

7.98

1.01

4

22.483

341.531

28.564

84517

3.69

1.06

5(S):阿魏酸

30.567

1091.744

93.979

163765

26.45

1.07

6

34.192

91.799

8.378

353859

13.63

1.83

7:洋川芎內(nèi)酯I

37.183

332.728

34.585

341335

12.35

1.02

8

38.658

68.700

7.003

354003

5.74

1.03

9

46.092

77.477

8.910

632635

30.24

1.01

10:洋川芎內(nèi)酯A

53.275

58.848

13.239

3619526

41.80

1.13

 

 

 

3 特征峰相對保留時間結(jié)果表

目標物

保留時間

相對保留時間測定值

相對保留時間規(guī)定值

偏差(%)

1:綠原酸

17.717

0.580

0.576

0.63

2:隱綠原酸

19.242

0.630

0.626

0.56

3:咖啡酸

21.383

0.700

0.678

3.18

4

22.483

0.736

0.731

0.62

5(S):阿魏酸

30.567

-

-

-

6

34.192

1.119

1.134

-1.36

7:洋川芎內(nèi)酯I

37.183

1.216

1.256

-3.15

8

38.658

1.265

1.306

-3.16

9

46.092

1.508

1.528

-1.32

10:洋川芎內(nèi)酯A

53.275

1.743

1.776

-1.86

 

由表2和表3中數(shù)據(jù)可知,川芎配方顆粒供試品溶液的特征峰個數(shù)為10個,與《川芎配方顆?!分幸?guī)定的特征峰個數(shù)一致;各特征峰與阿魏酸峰的相對保留時間分別為0.580(峰1)、0.630(峰2)、0.700(峰3)、0.736(峰4)、1.119(峰6)、1.216(峰7)、1.265(峰8)、1.508(峰9)、1.743(峰10),均在規(guī)定值的±10%范圍之內(nèi)。


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