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果膠酶(PG)檢測試劑盒(DNS比色法)產(chǎn)品介紹

來源:青島捷世康生物科技有限公司   2025年03月20日 10:21  

產(chǎn)品簡介:

天然果膠類物質(zhì)以原果膠、果膠(Pectin)、果膠酸的形態(tài)廣泛存在于植物的果實、根、莖、葉中,是細胞壁的一種組成成分,它們伴隨纖維素而存在,構(gòu)成相鄰細胞中間層粘結(jié)物,使植物組織細胞緊緊黏結(jié)在一起。果膠酶(Pectinase)是一類分解果膠質(zhì)酶類的總稱,實質(zhì)是多聚半乳糖醛酸水解酶,包括原果膠酶,果膠酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶四大類,廣泛存在于植物果實和微生物中,主要用于食品、釀酒、環(huán)保、醫(yī)藥、紡織及日化用品行業(yè)。

果膠酶(PG)檢測試劑盒(DNS 比色法)檢測原理是果膠酶水解果膠生成β-半乳糖醛酸,與二硝基水楊酸(DNS)反應(yīng)形成有色化合物,該化合物呈色強度與半乳糖醛酸濃度成正比,于分光光度計 540nm 處測定吸光度,通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較計算出樣品中果膠酶活性,主要用于定量檢測植物組織或果實中果膠酶,反應(yīng)顏色越深,吸光度越大,果膠酶的活性越強。該試盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料:

1、蒸餾水    

2、實驗材料:桃子、李子、蘋果、杏等果實或其他植物組織

3、電子天平、水果刀或剪刀、研缽或勻漿器、離心管或試管、離心機、水浴鍋

4、比色杯、分光光度計

操作步驟(僅供參考)

1、果膠酶提取:取果實或其他植物組織,洗凈,擦干,稱取剪碎的新鮮樣品 3g,置于提前 4℃預(yù)冷的研缽或勻漿器,加入 3ml 4℃預(yù)冷的 Pectinase Lysis Buffer,充分研磨或勻漿后轉(zhuǎn)入離心管或試管,410000g 離心 10min,留取上清液,即為果膠酶提取液,4℃保存待用。

2、稀釋半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)液:取適量的半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml),按下表進行稀釋:


加入物(單位:μl)

1

2

3

4

5

半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)

20

40

60

80

100

Pectinase Lysis Buffer

80

60

40

20

0

半乳糖醛酸濃度(μg/ml)

200

400

600

800

1000


 3、加樣:按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡,小心混勻。如果樣品中的果膠酶活性過高,可以減少樣品用量或適    當(dāng)稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設(shè)置 2 平行管,求平均值。


加入物(單位:ml)

空白管

標(biāo)準(zhǔn)管

對照管

測定管

Pectinase Lysis Buffer

0.3

半乳糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)(1~5 號管)

0.3

果膠酶提取液

0.2(提前煮沸 5min)

0.2

Pectinase Assay Buffer

0.1

0.1


37℃水浴 1h。

DNS 顯色液

0.3

0.3

0.3

0.3


 4、測定:沸水浴 5min,自來水中將離心管或試管冷卻至室溫,以蒸餾水稀釋至 2.4ml, 混勻,比色杯光徑 1cm,以空白管調(diào)零,以分光光度計立即系列標(biāo)準(zhǔn)管、對照管、測定管在 540nm 處吸光度。

注意事項:

1、 取樣量、試劑用量應(yīng)根據(jù)果膠含量適當(dāng)調(diào)整。

2、 可溶性糖對測定結(jié)果有較大影響,應(yīng)去除樣品中的可溶性糖。

3、 Pectinase Lysis Buffer 應(yīng)密閉保存,避免有效成分揮發(fā)。

4、 37℃水浴 1h 后,應(yīng)立即加入 DNS 顯色液。

5、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期:6 個月有效;低溫運輸,按要求保存。

 




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