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國(guó)抽方案|食品中乳鐵蛋白的測(cè)定

來(lái)源:島津(上海)實(shí)驗(yàn)器材有限公司 SGLC   2025年03月20日 13:09  

本文建立了食品中乳鐵蛋白的HPLC測(cè)定方法。參考GB 5009.299-2024中的色譜條件,采用色譜柱Shim-pack Scepter C4-300分析乳鐵蛋白,結(jié)果顯示,乳鐵蛋白峰型對(duì)稱(chēng),重現(xiàn)性良好,滿(mǎn)足檢測(cè)要求。此方法可為食品中乳鐵蛋白的測(cè)定提供參考。

 

 

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島津消耗品方案

 

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針對(duì)乳鐵蛋白的檢測(cè),SGLC可提供全套解決方案,包含以下產(chǎn)品:

Shim-pack Scepter C4-300, (5 μm, 4.6×250mm, PN: 227-31183-06)

SHIMSEN 肝素親和柱, ≥3mg(PN: 380-00930-02)

SHIMSEN Vial 低吸附PP樣品瓶及蓋墊,1.5mL(PN: 380-00511 & 380-00503)

SHIMSEN Disc PES聚醚砜材質(zhì)針式濾器, 25 mm, 0.45 µm  100/box (PN:380-00304)

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1. 實(shí)驗(yàn)部分

01

實(shí)驗(yàn)儀器及耗材

Shimadzu LC-40B X3高效液相色譜儀;

色譜柱:Shim-pack Scepter C4-300(5 μm,4.6×250 mm;P/N:227-31183-06)

純水機(jī):PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器)

SHIMSEN Disc HPTFE針式過(guò)濾器(P/N:380-00341);

低吸附PP樣品瓶SHIMSEN Vial(P/N:380-00509);

Nichipet Air移液槍?zhuān)篘ichipet Air 0.5-10 μL(P/N:00-NAR-10);

Nichipet Air 10-100 μL(P/N:00-NAR-100);

Nichipet Air 100-1000 μL(P/N:00-NAR-1000);

Nichipet Air 1000-10000 μL(P/N:00-NAR-10000)。

02

標(biāo)準(zhǔn)品系列工作液的制備

取牛乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)品50 mg,用水溶解配置標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(5.0 mg/mL)。取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 mL,用磷酸鹽緩沖液Ⅰ定容至10 mL,制成標(biāo)準(zhǔn)中間液體(0.5 mg/mL),臨用現(xiàn)配。

準(zhǔn)確移取上述牛乳鐵蛋白標(biāo)準(zhǔn)中間溶液,用磷酸鹽緩沖液Ⅰ稀釋定容,配制成濃度分別為1.0 μg/mL、5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、50.0 μg/mL、100.0 μg/mL 和200.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液,臨用現(xiàn)配。

注:乳鐵蛋白易被玻璃樣品瓶吸附,建議使用低吸附PP樣品瓶;低濃度點(diǎn)(1.0 μg/mL、5.0 μg/mL)需現(xiàn)配現(xiàn)進(jìn)樣。

微孔濾膜可能會(huì)導(dǎo)致目標(biāo)化合物吸附,樣品不建議過(guò)膜。

03

分析條件

色譜柱:Shim-pack Scepter C4-300(5 μm,4.6×250 mm;P/N:227-31183-06)

流 速:1.0 mL/min

進(jìn)樣量:50 μL

柱 溫:30 ℃

檢測(cè)器:280 nm

流動(dòng)相:A:0.1%三氟乙酸溶液

B:乙腈

梯度程序如下:

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2. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 

按照上述色譜條件(1.3)進(jìn)行采集,色譜圖如下:

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注:首次使用Shim-pack Scepter C4-300 色譜柱時(shí),可能出現(xiàn)響應(yīng)低(低濃度點(diǎn)甚至不出峰)、峰形不對(duì)稱(chēng)的情況,需對(duì)色譜柱進(jìn)行鈍化處理(即使用0.5 mg/mL 的標(biāo)品進(jìn)樣100 μL),鈍化后連續(xù)進(jìn)空白溶劑直至無(wú)乳鐵蛋白目標(biāo)峰后,再進(jìn)行分析。

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3. 結(jié)論

 

本文建立了食品中乳鐵蛋白的HPLC 測(cè)定方法。參考GB 5009.299-2024 中的色譜條件,采用色譜柱Shim-pack Scepter C4-300 分析乳鐵蛋白,結(jié)果顯示,乳鐵蛋白峰型對(duì)稱(chēng),重現(xiàn)性良好,滿(mǎn)足檢測(cè)要求。此方法可為食品中乳鐵蛋白的測(cè)定提供參考。

 

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