TO型生物制片透明劑(簡稱TO試劑
1.2 方法 ①按照病理檢查的目的和要求切取適當(dāng)大小的組織塊。②使用全自動組織脫水機(jī)對切好的組織塊進(jìn)行固定,脫水、透明、浸蠟,透明是采用TO試劑代替二甲苯,時間是30分鐘/缸,共二缸。③將處理好的組織常規(guī)石蠟包埋,在石蠟切片機(jī)上切成3-4um的切片。將切片放入60-65℃左右烤箱內(nèi)烤30分鐘即可,取出即放入TO試劑中脫蠟,時間 8-10分鐘/缸,共三缸。④常規(guī)HE染色后烤干切片。⑤用中性樹膠封固,閱片(中性樹膠采用TO試劑代替二甲苯進(jìn)行溶解)。
2 結(jié)果
透明:時間比二甲苯多10分鐘/缸,組織透明良好,透明后浸蠟良好。切片:不易脆裂,組織軟硬適中,厚薄均勻(3-4um),脫蠟:脫蠟干凈*,時間與二甲苯無明顯差異。
3 討論
TO試劑是一種以松節(jié)油為主要原料,并采用特殊配方合成的無色芳香透明液體,它有松香氣味,不溶于水,揮發(fā)性好,松節(jié)油在空氣zui高允許濃度為300g/m3[2],>25度能與95%乙醇互溶,能溶解石蠟、樹膠等。TO試劑折光率1.46,與玻片的折光率1.50相似,因而能使其透明和封固的切片鏡檢清晰。
TO試劑安全無毒無臭味:透明效果理想;長時間浸泡組織不會使組織變脆,還能增強(qiáng)浸蠟效果,反而有利于切片;不與水汽混合,即使在潮濕的環(huán)境中使用,也不會因吸收水汽而濃度下降;不易變質(zhì),可長期存放。
TO試劑在脫水過程中,按正常的脫水步驟操作,把二甲苯換成TO試劑,透明時間控制在20-30分鐘左右 (夏季短點(diǎn),冬季長點(diǎn)),TO試劑在25度以下溶解石蠟比較慢,當(dāng)溫度超過35度時,溶解蠟的速度明顯加快,50度時溶解石蠟的速度與二甲苯差不多。在冬季,如果工作室內(nèi)的溫度較低,建議把玻片放盛有TO試劑的梁色缸中,然后把染色缸放烘箱中脫蠟,分二至三缸,脫蠟時間8-10分鐘左右。在氣溫較高的季節(jié)或常年氣溫較高的省份,可以把烘箱中剛烤好的玻片連同染色架趁溫度高時直接放入不加溫的TO試劑中,分三缸,脫蠟時間 20分鐘左右,TO試劑還能用來稀釋中性樹膠,比例為1:1,不過溶解速度慢,可以放在烘箱中使其較快充分溶解。
TO試劑還可用于其它病理制片中,如:免疫組化、冰凍切片、特殊染色等,該產(chǎn)品由廣西農(nóng)學(xué)院與廣西岑溪松香廠聯(lián)合研制,經(jīng)廣西壯族自治區(qū)藥檢所的毒理檢驗,安全無毒,產(chǎn)品推出后在全國大面積使用,經(jīng)過五年的實(shí)踐,該產(chǎn)品透明效果理想,切片質(zhì)量與二甲苯無異,還不會出現(xiàn)二甲苯浸泡時間長易碎片。
相關(guān)產(chǎn)品
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