一、儀器校準(zhǔn)與準(zhǔn)備
- 校準(zhǔn)儀器:
- 開啟儀器,檢查溫度、壓力、濕度等參數(shù)是否正常。
- 使用標(biāo)準(zhǔn)菌株或校準(zhǔn)工具驗(yàn)證菌落計(jì)數(shù)功能,確保儀器顯示精度符合要求。
- 試劑與樣品準(zhǔn)備:
- 準(zhǔn)備無菌生理鹽水、培養(yǎng)基(如營養(yǎng)瓊脂)、無菌棉拭子等。
- 樣品需進(jìn)行無菌處理,若為液體需控制顆粒雜質(zhì)(如離心或過濾)。
二、樣品處理與加載
- 無菌操作:
- 在潔凈臺(tái)或無菌室內(nèi)操作,避免環(huán)境微生物污染。
- 固體樣品用無菌棉拭子擦拭表面,液體樣品直接抽濾。
- 加載樣品:
- 將樣品注入濾杯,注意液體高度不超過刻度線。
- 啟動(dòng)真空泵,使樣品通過濾膜,微生物被截留在膜上。
三、濾膜轉(zhuǎn)移與培養(yǎng)
- 轉(zhuǎn)移濾膜:
- 用無菌鑷子取出濾膜,菌面朝上貼于培養(yǎng)基表面,避免氣泡。
- 封閉培養(yǎng)皿,標(biāo)記樣品信息。
- 恒溫培養(yǎng):
- 將培養(yǎng)皿置于恒溫培養(yǎng)箱,根據(jù)微生物類型設(shè)定溫度(如37℃)和時(shí)間(24-48小時(shí))。
- 培養(yǎng)期間每日觀察菌落生長情況。
四、菌落計(jì)數(shù)與分析
- 計(jì)數(shù)規(guī)則:
- 培養(yǎng)結(jié)束后,統(tǒng)計(jì)濾膜上的菌落數(shù),按公式換算為樣品中的微生物含量。
- 區(qū)分細(xì)菌、霉菌、酵母菌,記錄形態(tài)學(xué)特征。
- 結(jié)果分析:
- 對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)限值(如藥典規(guī)定),判斷樣品是否合格。
- 異常結(jié)果需復(fù)檢或結(jié)合其他方法驗(yàn)證。
五、清潔與維護(hù)
- 儀器清潔:
- 使用75%酒精擦拭儀器表面,濾杯、硅膠管用蒸餾水沖洗后晾干。
- 真空泵定期更換機(jī)油,保持管路暢通。
- 耗材管理:
- 濾膜、密封圈等耗材需干燥保存,避免污染。
- 定期校準(zhǔn)儀器,記錄維護(hù)日志。
總結(jié):微生物限度儀通過“校準(zhǔn)-抽濾-培養(yǎng)-計(jì)數(shù)-維護(hù)”的閉環(huán)流程,為藥品、食品等領(lǐng)域提供高效的微生物污染檢測(cè)方案。標(biāo)準(zhǔn)化操作結(jié)合嚴(yán)格質(zhì)控,是保障產(chǎn)品質(zhì)量與安全的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
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