一、電爐隔水加熱法
(1) 將薄?。?0X10X2mm)的組織放入40%甲醛的小燒杯中,燒開10秒,然后移去酒精燈,再固定1分鐘
(2) 用手術(shù)刀將組織修成1毫米左右厚的薄片,再放回40%的甲醛(熱)溶液內(nèi)1分鐘
(3) 將組織取出,水洗
(4) 用濾紙壓干組織中的水份
(5) 再放入水浴的純丙酮中4~6分鐘(中間更換一次丙酮)水溫控制在70℃左右
(6) 輕壓組織有彈性感后,放入60~70℃的石蠟中浸蠟5分鐘
(7) 用加熱的電烙鐵將組織嵌入事先準(zhǔn)備好的空蠟塊中,用載玻片壓平組織,放在冰上冷卻
(8) 常規(guī)石蠟切片,輕輕的將蠟塊修至組織面*暴露后,切片,切片厚度4~5微米,修片時(shí)不能修的太厚,否則組織容易蹦出。
(9) 將切片撈于載玻片后加熱烤片10~15秒,烤片溫度不宜超過80℃,更不能將組織烤焦,可邊烤邊用濕布磨擦載玻片反面降溫
(10) 快速放入二甲苯快速脫蠟(2道),梯度酒精洗,入水
(11) 蘇木素滴加在載玻片上,加熱1~2分鐘(60℃左右,不能將蘇木素?zé)_,以防切片脫落)
(12) 水洗
(13) 鹽酸酒精分化1秒鐘
(14) 水洗,溫水藍(lán)化
(15) 伊紅2~5秒鐘
(16) 梯度酒精快速脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。
注意事項(xiàng):由于丙酮極易揮發(fā)燃燒,使用電爐隔水加熱法必須時(shí)刻注意安全
二、超聲波快速處理儀法
(1) 先將超聲波快速處理儀開機(jī)預(yù)熱至70℃
(2) 將薄?。?0X10X2mm)的組織放入40%的甲醛或AAF液的小燒杯中超聲處理4分鐘
(3) 用手術(shù)刀將組織修成1毫米左右厚的薄片,再放回固定液內(nèi)2分鐘
(4) 取出組織,水洗10秒鐘,放在濾紙上吸干
(5) 放入純丙酮中超聲處理2~3分鐘,取出組織,放在濾紙上吸干,再放入純丙酮4~6分鐘,直至組織上浮
(6) 放入二甲苯中超聲處理3分鐘
(7) 放入熔融的石蠟中(70℃)超聲處理5分鐘,可用鑷子輕壓組織,直至無氣泡產(chǎn)生
(8) 用加熱的電烙鐵或鑷子將組織嵌入事先準(zhǔn)備好的空蠟塊中,用載玻片壓平組織,放在冰上冷卻
(9) 常規(guī)石蠟切片,輕輕的將蠟塊修至組織面*暴露后,切片,切片厚度4~5微米
(10)
將切片撈于載玻片后加熱烤片10~15秒,烤片溫度不宜超過80℃,更不能將組織烤焦,可邊烤邊用濕布磨擦載玻片反面降溫
(11) 快速放入二甲苯快速脫蠟(2道),梯度酒精洗,入水
(12) 蘇木素滴加在載玻片上,加熱1~2分鐘(60℃左右,不能將蘇木素?zé)_,以防切片脫落)
(13) 水洗
(14) 鹽酸酒精分化1秒鐘
(15) 水洗,溫水藍(lán)化
(17) 伊紅2~5秒鐘
(18) 梯度酒精快速脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。
參考文獻(xiàn):
1、王伯沄,李玉松,黃高升,張遠(yuǎn)強(qiáng)《病理學(xué)技術(shù)》
2、凌啟波《實(shí)用病理特殊染色和組化技》
3、劉介眉等《病理組織染色的理論方法和應(yīng)用》
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