在哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)中，選擇合適的培養(yǎng)基對于細(xì)胞的生長和功能維持至關(guān)重要。DMEM 高糖培養(yǎng)基（含 10% 血清，1% 雙抗）以其全面的營養(yǎng)成分和即用型配方，成為眾多細(xì)胞培養(yǎng)場景的理想選擇。

一、DMEM 高糖培養(yǎng)基的配方與特點

即用型配方，便捷高效

DMEM 高糖培養(yǎng)基經(jīng)過精心配制，已包含 10% 胎牛血清和 1% 雙抗（青霉素 - 鏈霉素溶液），無需額外添加成分，開瓶即可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。這種即用型設(shè)計大大簡化了實驗前的準(zhǔn)備工作，減少了因配制培養(yǎng)基帶來的誤差和污染風(fēng)險，特別適合那些對時間敏感的實驗和需要快速啟動培養(yǎng)的場景。

營養(yǎng)全面，支持細(xì)胞生長

DMEM 培養(yǎng)基本身含有豐富的營養(yǎng)成分，包括各種氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和葡萄糖。與 MEM 相比，DMEM 增加了多種成分的用量，尤其是葡萄糖含量高于 4,500mg/L，為細(xì)胞提供了充足的能源供應(yīng)。10% 胎牛血清的添加進(jìn)一步豐富了培養(yǎng)基中的生長因子和細(xì)胞黏附因子，支持細(xì)胞的快速增殖和健康生長。1% 雙抗成分則有效抑制細(xì)菌和真菌的生長，降低培養(yǎng)過程中的污染風(fēng)險。

二、DMEM 高糖培養(yǎng)基的應(yīng)用范圍

廣泛適用于多種細(xì)胞類型

DMEM 高糖培養(yǎng)基適用于多種哺乳動物細(xì)胞的培養(yǎng)，包括但不限于成纖維細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等原代細(xì)胞，以及常見的細(xì)胞系如 HeLa、293、Cos-7 和 PC-12 等。對于生長速度快、粘附性低的細(xì)胞系，如雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA 轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞等，該培養(yǎng)基能夠提供理想的生長環(huán)境，促進(jìn)細(xì)胞的旺盛生長和穩(wěn)定傳代。

滿足多種研究和生產(chǎn)需求

在生物制藥領(lǐng)域，DMEM 高糖培養(yǎng)基被廣泛用于疫苗生產(chǎn)和重組蛋白表達(dá)。例如，利用 CHO 細(xì)胞生產(chǎn)重組人促紅細(xì)胞生成素（EPO）和乙肝疫苗等。其高糖配方為細(xì)胞的高密度培養(yǎng)和生產(chǎn)過程提供了充足的能源，有助于提高產(chǎn)物的產(chǎn)量和質(zhì)量。在基礎(chǔ)研究中，該培養(yǎng)基為細(xì)胞的長期培養(yǎng)、基因轉(zhuǎn)染、藥物篩選等實驗提供了穩(wěn)定的培養(yǎng)平臺。

三、DMEM 高糖培養(yǎng)基的操作使用方法

儲存與準(zhǔn)備

DMEM 高糖培養(yǎng)基應(yīng)保存在 4℃左右的低溫環(huán)境中，避免光照直射和溫度波動過大。在使用前，將培養(yǎng)基從冰箱中取出，使其恢復(fù)至室溫，以確保細(xì)胞在接種時不會因溫度驟變而受到應(yīng)激。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

1. 細(xì)胞接種：根據(jù)細(xì)胞類型和實驗需求，將細(xì)胞以適當(dāng)?shù)拿芏冉臃N到培養(yǎng)容器中。對于貼壁細(xì)胞，可以使用培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板；對于懸浮細(xì)胞，通常使用搖瓶或懸浮培養(yǎng)袋。

2. 培養(yǎng)條件：將接種后的細(xì)胞放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中，設(shè)置溫度為 37℃，濕度保持在 95% 以上，二氧化碳濃度為 5% 左右。這些條件有助于維持培養(yǎng)基的 pH 值穩(wěn)定，為細(xì)胞提供一個適宜的生長環(huán)境。

3. 定期換液：根據(jù)細(xì)胞的生長速度和代謝需求，定期更換培養(yǎng)基，一般每 2 - 3 天更換一次。換液時，吸出舊的培養(yǎng)基，用適量的 PBS 或無菌生理鹽水輕輕沖洗細(xì)胞，再加入新鮮的 DMEM 高糖培養(yǎng)基。

4. 觀察與記錄：在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，定期使用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)和生長狀態(tài)，記錄細(xì)胞的生長曲線和分裂情況。注意觀察細(xì)胞的貼壁情況、細(xì)胞密度和細(xì)胞形態(tài)是否正常。

后續(xù)處理

當(dāng)細(xì)胞生長達(dá)到實驗要求的密度或狀態(tài)時，可以進(jìn)行下一步實驗操作。對于需要長期保存的細(xì)胞，可以將細(xì)胞凍存于液氮中。凍存時，使用含 10% DMSO 的凍存培養(yǎng)基，將細(xì)胞懸浮液分裝到凍存管中，放入程序降溫盒中逐步降溫，最終保存于液氮罐中。