淡紫色擬青霉的生理作用與注意事項(xiàng)及保藏方法!
淡紫擬青霉((Paecilomyces lilacinus(Thorn.)Samson)屬于內(nèi)寄生性真菌,是一些植物寄生線蟲的重要天敵,能夠寄生于卵,也能侵染幼蟲和雌蟲,可明顯減輕多種作物根結(jié)線蟲、胞囊線蟲、莖線蟲等植物線蟲病的危害。
一、菌種簡(jiǎn)介
平臺(tái)編號(hào):Bio-52586
規(guī)格:凍干物
拉丁屬名:Paecilomyces Lilacinus
菌株名稱:淡紫色擬青霉
其他編號(hào):MCWA18
培養(yǎng)基編號(hào):17
培養(yǎng)溫度:25-28℃
培養(yǎng)時(shí)間:5-7 天
用途:防治線蟲的真菌。
用途:防治線蟲的真菌。
注意事項(xiàng):僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(產(chǎn)品信息以出庫(kù)為準(zhǔn))
二、培養(yǎng)基
綜合馬鈴薯培養(yǎng)基(PDA)
20%馬鈴薯汁 1L 葡萄糖 20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3g
Vitanib B1 (硫胺素) Trace 微量約 8mg Agar (瓊脂) 20g pH 自然
20%馬鈴薯汁配制方法:馬鈴薯洗凈去皮,取 200 克切成小塊 , 加水 1000 毫升煮沸 20 分鐘后濾去馬鈴薯塊,將濾液補(bǔ)足 1000ml。
三、保藏條件
安瓿瓶?jī)龈删N和培養(yǎng)物應(yīng)在 2-8°C 保存。西林瓶菌種請(qǐng)置于-20℃冷凍。甘油保藏溫度為-80°C;請(qǐng)勿長(zhǎng)期置于室溫。
四、淡紫擬青霉的生理作用
1、促進(jìn)植物生長(zhǎng)
在培養(yǎng)擬青霉的過(guò)程中。,特別是在特殊培養(yǎng)基和深層發(fā)酵中,它能產(chǎn)生豐富的衍生物。其中一種類似吲哚乙酸產(chǎn)品,其顯著的生理作用是在低濃度下促進(jìn)植物根系和植物的生長(zhǎng)。因此,在植物根部施用細(xì)菌不僅能明顯抑制線蟲侵染,促進(jìn)植物營(yíng)養(yǎng)器官的生長(zhǎng),還能促進(jìn)種子的萌發(fā)和生長(zhǎng)。
2、產(chǎn)生多種功能酶
該菌株能產(chǎn)生豐富的幾丁質(zhì)酶,能降解幾丁質(zhì),促進(jìn)線蟲卵的孵化,增加擬青霉對(duì)線蟲的寄生率,還能產(chǎn)生細(xì)胞溶解酶、葡聚糖酶和絲蛋白酶。Galvez-Mariscal研究表明,高效菌株中蛋白酶、葡聚糖酶和淀粉酶的活性分別高出1.2-4.2倍和20-120倍,這些酶促進(jìn)細(xì)胞分裂。
3、退化效應(yīng)
Somaseknar研究發(fā)現(xiàn)淡紫擬青霉能促進(jìn)不溶性磷酸鹽的溶解。實(shí)驗(yàn)室研究證實(shí),擬青霉的增溶效果達(dá)到30%,其他線蟲的增溶效果達(dá)到20%~40%。類似的研究還表明,擬青霉還能促進(jìn)許多化學(xué)聚合物的分解(如農(nóng)業(yè)和制革廢水等。),證明淡紫擬青霉具有一定的環(huán)保效果。
4、淡紫擬青霉
淡紫擬青霉是一種純微生物活孢子制劑,具有高效、廣譜、長(zhǎng)效、安全、無(wú)污染、無(wú)殘留的特點(diǎn),能明顯刺激作物生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)證明,應(yīng)用淡紫擬青霉。植物根系周圍不僅能明顯抑制線蟲侵染,還能促進(jìn)植物根系和營(yíng)養(yǎng)器官的生長(zhǎng),如播前拌種和種植時(shí)穴施,能促進(jìn)種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng),實(shí)現(xiàn)出苗充分、苗綠和苗壯,一般可使作物增產(chǎn)15%以上。
5、根結(jié)線蟲的防治
有機(jī)蔬菜生產(chǎn)中植物線蟲生物防治的主要生物類型,淡紫擬青霉,并提出了提高生物防治效果的途徑。植物線蟲在我國(guó)局部發(fā)生,危害嚴(yán)重。幾乎每種作物都有一種或兩種線蟲,而且其中一些線蟲的危害面積不斷擴(kuò)大,危害越來(lái)越大,已成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中急需解決的問(wèn)題之一。淡紫擬青霉在植物根系周圍施用淡紫擬青霉菌劑,不僅能明顯抑制線蟲侵染,還能促進(jìn)植物根系和營(yíng)養(yǎng)器官的生長(zhǎng)。
傳統(tǒng)的化學(xué)防治對(duì)農(nóng)民有毒,危害綠色食品的生產(chǎn),所以我們應(yīng)該尋找新的技術(shù)。淡紫擬青霉對(duì)植物病原線蟲的生物防治是目前的研究熱點(diǎn)。已發(fā)現(xiàn)能控制線蟲病的生物包括捕食線蟲的真菌、線蟲、渦蟲、蚯蚓、昆蟲、螨類等。寄生病毒、原生動(dòng)物、細(xì)菌等。;也可以用植物提取物,防治效果也不錯(cuò)。
生物防治是目前疾病控制中很有前途的一種防治方法,符合環(huán)保健康的理念。然而,我國(guó)用于防治根結(jié)線蟲的生防產(chǎn)品很少,對(duì)根結(jié)線蟲有作用的生防制劑大多還處于研發(fā)階段。目前注冊(cè)的生防產(chǎn)品是線蟲、阿維菌素和最近注冊(cè)的淡紫擬青霉。阿維菌素廣泛應(yīng)用于蔬菜根結(jié)線蟲的防治。0.5%阿維菌素顆粒劑15-17.5克/畝可用于溝施或穴施。但阿維菌素作為一種生物農(nóng),有著幾乎所有生物農(nóng)都不可避免的弱點(diǎn),即田間應(yīng)用效果不穩(wěn)定。
根結(jié)線蟲病主要危害蔬菜根系,側(cè)根和須根易受傷害。受影響的根產(chǎn)生不同大小的腫瘤或根瘤。根節(jié)起初白色柔軟,后變?yōu)闇\黃褐色或深褐色,表面粗糙,有時(shí)有裂紋。剖開(kāi)根結(jié),可見(jiàn)白色珍珠狀顆粒,為根結(jié)線蟲雌性成蟲。感染根結(jié)線蟲的蔬菜生長(zhǎng)發(fā)育緩慢,葉片小而黃。病害嚴(yán)重時(shí),植株矮小、衰弱或不良,天氣炎熱干燥時(shí),植株容易枯萎甚至死亡。
五、注意事項(xiàng)
1)凍干粉活化,干粉要全部用完,不能預(yù)留,用無(wú)菌吸管吸取 0.3ml 的培養(yǎng)液(即以上建議的培養(yǎng)基配方,不加瓊脂)或者無(wú)菌水,滴入凍干管中,輕輕振蕩至其溶解。吸取全部菌懸液,接種在培養(yǎng)基上(建議不超過(guò) 2 支平板或者斜面,若接種液體培養(yǎng)基,則試管液體不超過(guò) 5ml 為宜);
2)經(jīng)過(guò)冷凍干燥保藏,菌種處于休眠狀態(tài),復(fù)蘇培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)延遲生長(zhǎng),這時(shí)需較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間; 若您收到的是已復(fù)蘇的培養(yǎng)物(非凍干菌),則可以直接用于您的實(shí)驗(yàn),或根據(jù)需要轉(zhuǎn)接培養(yǎng)如有不明白之處,請(qǐng)務(wù)必先咨詢我單位技術(shù)人員,避免不必要的損失;
3)微生物菌種應(yīng)保藏于低溫、清潔干燥的地方,室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致菌種衰退;
4)菌種操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行;轉(zhuǎn)種完畢,應(yīng)經(jīng)滅菌再做丟棄處理;
5)應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接,凍干菌種保藏時(shí)間通常為 2-25 年;
6)菌種使用過(guò)程中如出現(xiàn)雜菌污染或菌種生產(chǎn)性能下降或不活,請(qǐng)?jiān)谑盏胶?2 個(gè)月內(nèi)和微生物菌種查詢網(wǎng)聯(lián)系,逾期不予受理;
7)打管操作需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)的防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行,生物危害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作,打管時(shí)凍干管應(yīng)遠(yuǎn)離面部,保護(hù)眼睛。
8)安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò) 75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量(2-3滴)無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端并將凍干管開(kāi)口處在火焰上過(guò)一遍,并保持在火焰旁操作。
9)甘油管使用:使用本甘油菌時(shí)可以不用融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或進(jìn)行液體培養(yǎng)即可。也可以融解后使用,但隨著凍融次數(shù)的增加,細(xì)菌的活力會(huì)逐漸下降。
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