引言
CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)需高效遞送至細胞核，但傳統(tǒng)方法難以實現(xiàn)時空精準控制。Biotin-PEG-BCN通過生物正交反應（如應變促進的環(huán)加成反應，SPAAC），可構(gòu)建響應性遞送載體，為基因治療提供新策略。

載體設計與功能

1. 結(jié)構(gòu)組成：

· Biotin：與鏈霉親和素結(jié)合，實現(xiàn)載體靶向富集。

· PEG：提高載體穩(wěn)定性和生物相容性。

· BCN：通過SPAAC反應與疊氮化物修飾的Cas9蛋白/sgRNA復合物結(jié)合，形成納米級遞送系統(tǒng)。

2. 功能優(yōu)化：

· 核定位信號（NLS）修飾：促進載體-基因復合物進入細胞核。

· 光控釋放系統(tǒng)：通過近紅外光觸發(fā)BCN-疊氮鍵斷裂，實現(xiàn)時空精準釋放。

在基因編輯中的應用

1. 遞送效率評估：

· 熒光標記sgRNA與Biotin-PEG-BCN復合，通過流式細胞術(shù)分析細胞轉(zhuǎn)染率，優(yōu)化N/P比和光照條件。

2. 脫靶效應分析：

· 結(jié)合全基因組測序，比較生物正交遞送組與傳統(tǒng)方法組的脫靶位點頻率，驗證載體安全性。

案例研究
在杜氏肌營養(yǎng)不良癥（DMD）模型中，Biotin-PEG-BCN遞送的CRISPR/Cas9系統(tǒng)實現(xiàn)dystrophin基因的高效修復，肌肉功能恢復率達70%，顯著優(yōu)于病毒載體組（40%）。

技術(shù)優(yōu)勢

· 精準可控：生物正交反應和光控釋放確?；蚓庉嫷臅r空精準性。

· 低免疫原性：非病毒載體減少免疫反應，適用于重復給藥。

相關(guān)產(chǎn)品

TCO-PEG3-acid，CAS:2141981-86-2

TCO-PEG36-acid，反式環(huán)辛烯-三十六聚乙二醇-羧酸

TCO-PEG24-NHS ester，CAS:2055646-26-7，反式環(huán)辛烯-二十四聚乙二醇-羥基琥珀酰亞胺酯

TCO-PEG8-amine，CAS:2353409-92-2，反式環(huán)辛烯-八聚乙二醇-氨基TCO-PEG8-TCO，CAS:2353409-67-1，反式環(huán)辛烯-八聚乙二醇-反式環(huán)辛烯1-辛炔，1-SiM alkyne，CAS號:629-05-0Alkyne tyramide,CAs號:1694495-59-4