手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
掃碼關(guān)注視頻號
ITC等溫滴定量熱儀是一種用于測量生物分子相互作用（如酶-底物、抗體-抗原、核酸-配體等）的熱力學(xué)參數(shù)的精密儀器。
以下是ITC等溫滴定量熱儀實驗操作步驟：
1. 加載樣品
滴定池（Sample Cell）：
加入受體溶液（如蛋白質(zhì)或核酸溶液）。
注射器（Syringe）：
吸入配體溶液（如底物或抑制劑），確保無氣泡，安裝到注射器模塊。
2. 開始滴定
基線穩(wěn)定：
啟動儀器，等待基線穩(wěn)定。
初始滴定：
執(zhí)行一次大體積滴定，觀察信號響應(yīng)，檢查是否漏液或堵塞。
正式滴定：
按設(shè)定參數(shù)逐滴滴定，記錄每次滴定后的熱量變化。
觀察信號峰值和回歸基線情況，避免過載或飽和。
3. 數(shù)據(jù)采集
實時監(jiān)控：
觀察軟件中的原始滴定曲線，確保信號正常（如峰形對稱、無異常噪聲）。
保存數(shù)據(jù)：
實驗結(jié)束后保存原始數(shù)據(jù)文件，備份至本地或云端。
二、ITC等溫滴定量熱儀實驗后處理：
1. 清洗儀器
沖洗注射器和滴定池：
用超純水或緩沖液多次沖洗，去除殘留樣品。
拆卸注射器，用專用工具清洗活塞和密封圈，避免堵塞。
干燥與維護：
擦干儀器表面，定期檢查攪拌子、溫度傳感器和電路連接。
2. 數(shù)據(jù)分析
擬合模型：
使用分析軟件對原始數(shù)據(jù)進行擬合。
選擇合適模型（如單一站點結(jié)合模型、多站點模型或異構(gòu)結(jié)合模型）。
參數(shù)提?。?/div>
結(jié)合常數(shù)（Ka）：反映配體與受體的結(jié)合親和力。
焓變（ΔH）：結(jié)合過程的熱量變化（正值為放熱，負值為吸熱）。
熵變（ΔS）和吉布斯自由能（ΔG）：通過范特霍夫方程計算。
化學(xué)計量數(shù)（n）：配體與受體的結(jié)合比例。
3. 結(jié)果驗證
重復(fù)實驗：
重復(fù)至少3次獨立實驗，確保數(shù)據(jù)一致性。
對照實驗：
設(shè)置空白對照（如緩沖液滴定緩沖液），排除非特異性信號。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
聯(lián)系我們
400-875-1717 （周一至周五 8:30-17:30）關(guān)注我們
-
化工儀器網(wǎng)APP
-
儀器優(yōu)選APP
Copyright
chem17.com All Rights Reserved 法律顧問：浙江天冊律師事務(wù)所 賈熙明律師
-
全年征稿/資訊合作
0571-87759900
點我咨詢 -
微信公眾號
隨時掌握行業(yè)動態(tài)
采購中心
采購專員1對1咨詢